原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號
P-X1840
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
膀胱組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品類別
小鼠原代細(xì)胞
傳代特性
可傳3代左右
用途
僅供科研
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞分離自膀胱組織；膀胱是主要由平滑肌細(xì)胞組成的中空器官，膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細(xì)胞表型的調(diào)控和可誘導(dǎo)一氧化氮合酶的表達(dá)與多種病理狀況有關(guān)，包括膀胱功能障礙。研究表明，組織缺氧抑制膀胱平滑肌細(xì)胞的增殖，膀胱平滑肌細(xì)胞的分化依賴于膀胱上皮細(xì)胞釋放的因子。膀胱平滑肌細(xì)胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細(xì)胞所經(jīng)歷的機(jī)械變形頻率而改變。平滑肌是許多中的共同路徑，因此，了解在發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化，這是方法取得進(jìn)展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)而外為黏膜層、肌層和外膜。其中，肌層主要由平滑肌構(gòu)成。膀胱平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細(xì)胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細(xì)胞的必要手段，也是研究平滑肌瘤的基礎(chǔ)與前提。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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人直腸平滑肌細(xì)胞 Primary human rectal smooth muscle cells |
雜交瘤細(xì)胞株；LT003 |
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小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞 |
雜交瘤細(xì)胞株；CD4-4D10 |
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Capan-1（人胰腺癌細(xì)胞）（STR鑒定正確） |
人高轉(zhuǎn)移鼻細(xì)胞 |
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人乳腺癌組織源細(xì)胞 |
人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞 |
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MDA-MB-157 (人乳腺癌細(xì)胞) |
人直腸平滑肌細(xì)胞 Primary human rectal smooth muscle cells |
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人皮膚成纖維細(xì)胞；HSAS4 |
小鼠骨髓纖維原細(xì)胞；M2-10B4 |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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組氨酸三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體 HINT1 |
適配體（ADAPTER）連接試劑盒 |
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核運(yùn)輸因子1抗體 NXT1 |
細(xì)胞質(zhì)多聚腺苷酸結(jié)合蛋白1抗體 |
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核孔糖蛋白P62抗體 Nucleoporin p62 |
LCN6 |
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DNA糖基化酶FPG2抗體 NEI3 |
附睪特異蛋白6抗體 |
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轉(zhuǎn)錄因子SOX7抗體 SOX7 |
大鼠脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)elisa檢測試劑盒 |
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磷酸化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 phospho-TRAP220 (Thr1457) |
小鼠γ-氨基丁酸(γABA)elisa檢測試劑盒 |
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磷酸化蛋白激酶A受體2α亞基抗體 phospho-PRKAR2A (Ser99) |
NSUN6蛋白抗體 NSUN6 |
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胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體 EXOC2 |
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 p107 |
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DCUN1D4蛋白抗體 DCUN1D4 |
上皮細(xì)胞膜蛋白3抗體 EMP3 |
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補(bǔ)體C5抗體 C5a |
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD11c單克隆抗體 mouse CD11c/Pacific Blue |
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鋅指蛋白131抗體 ZNF131 |
細(xì)胞核蛋白提取試劑盒50T |
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體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶2D6（DEXTROMETHORPHAN） 活性高效液相色譜法（HPLC）定量檢測試劑盒 |
人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞（白介素15基因修飾）；THP-1/IL15 |
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人核糖核酸抑止劑(RNH1/PRI/RNH)elisa分析檢測試劑盒 |
鋅指蛋白427抗體 ZFP472 |
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大鼠白介素4(IL－4)elisa檢測試劑盒 |
人胱天蛋白酶9（Caspase-9）elisa檢測試劑盒 |
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小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa分析檢測試劑盒 |
大鼠黃體**素(LH)elisa分析檢測試劑盒 |
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綿羊3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞ATP酶法冰凍切片人體肌肉組織分型染色試劑盒 |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無菌操作?：整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對于需要長期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。