原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
產(chǎn)品貨號(hào)
P-X1527
產(chǎn)品規(guī)格
5×105
組織來源
心臟組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
梭形、多角形
產(chǎn)品類別
大鼠原代細(xì)胞
傳代特性
屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
用途
僅供科研
大鼠心肌細(xì)胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心肌細(xì)胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀；細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右，細(xì)胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)搏動(dòng)；心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞，在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點(diǎn)，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動(dòng)，且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡(jiǎn)便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點(diǎn)。利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動(dòng)力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號(hào)通路、對(duì)作用于心臟的新藥進(jìn)行篩選并對(duì)其性進(jìn)行評(píng)價(jià)以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價(jià)值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對(duì)于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法，并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠心肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)信息：包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔單核細(xì)胞 Rabbit monocyte |
雜交瘤細(xì)胞；HTK |
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小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞 Mouse primary bronchial smooth muscle cells |
雜交瘤細(xì)胞；2G4 |
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CX-1（人結(jié)腸癌細(xì)胞）(STR鑒定正確) |
人畸胎瘤細(xì)胞 |
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小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長春新堿耐藥株 |
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MHCC97-L (人低轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞) |
兔單核細(xì)胞 Rabbit monocyte |
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人乳腺癌細(xì)胞；MCF7 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；HB BADCPPF1-63D |
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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Methamphetamine(4D2) |
大鼠D-甘油醛3-磷酸elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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OXGR1/GPR80 |
Heme結(jié)合蛋白2抗體 |
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G蛋白偶聯(lián)受體80抗體 |
OTOP3 |
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胰島素促進(jìn)因子抗體（胰十二指腸源異型盒蛋白） Anti-PDX1 |
OTOP3蛋白抗體 |
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甲基（）單克隆抗體 |
人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)elisa分析檢測(cè)試劑盒 |
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轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體 Anti-SIM1 |
Rat D-glyceraldehyde 3-phosphate ELISA Kit |
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蛋白酶體復(fù)合物C5抗體 Anti-PRS3/PRE7 |
EGF應(yīng)答因子1抗體抗體 Anti-ZFP36L1/ERF1 |
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SEC63域內(nèi)含蛋白1抗體 |
S100鈣結(jié)合蛋白A7抗體 Anti-S100A7/Psoriasin |
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促甲狀腺素受體抗體（C端） Anti-TSHR (CT) |
視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體 Anti-RARRES1/TIG1 |
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HFM1 |
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK8抗體 Anti-NEK8 |
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p21激活激酶2抗體 |
環(huán)指蛋白189抗體 Anti-Rffl/RING finger protein 189 |
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鋅指蛋白672抗體 Anti-ZNF672 |
人肝癌細(xì)胞；Hep3b |
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神經(jīng)肽Y受體4抗體 Anti-NPY4R |
PAK2 |
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DAZ1 |
細(xì)胞NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒 |
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無精癥缺失基因1抗體 |
絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體 Anti-SAPK3/MAPK12/p38gamma |
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轉(zhuǎn)錄因子MAFF抗體 |
大鼠心肌細(xì)胞MAFF |
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無菌操作?：整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。