微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 放線菌孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過(guò)0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，不利于放線菌孢子的形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時(shí)間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備

搖瓶種子進(jìn)罐，常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng)，有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備

種子罐種子制備的工藝過(guò)程，因菌種不同而異，一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為種子，把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級(jí)種子，將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理，使用三級(jí)種子的發(fā)酵，稱為四級(jí)發(fā)酵。

基本信息：

產(chǎn)品名稱：Stbl3大腸桿菌培養(yǎng)

拉丁文:

Escherichia coli Stbl3

提供形式: 西林瓶，菌片

**等級(jí): 1

模式菌株: 未知

應(yīng)用領(lǐng)域: 用于基因克隆，具有鏈霉素抗性

培養(yǎng)基: LB

酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃，15min**。

生長(zhǎng)條件: 37℃，有氧，LB

存儲(chǔ)條件: -20℃避光保存；運(yùn)輸條件：常溫運(yùn)輸。

培養(yǎng)方法:

培養(yǎng)基 0012

生長(zhǎng)條件 28℃

存儲(chǔ)條件 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

培養(yǎng)及打管說(shuō)明：

1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。

T1N0 肉湯         進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于霍亂弧的生長(zhǎng)試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)） T1N0  Broth 250

強(qiáng)化梭鑒別瓊脂(DRCA) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于食品和其它物質(zhì)中梭的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)(MERCK方法) Differentia Reinforced Clostridial Agar 250

Half –Fraser 添加劑 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 添加到HB4190中，用于李氏的選擇性增培養(yǎng) Half-Fraser Supplement 5ml*2

牛肉浸粉    進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 培養(yǎng)基原材料，提供細(xì)生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子 Beef Extract Powder 250

麥康凱瓊脂(不含鹽)     進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 用于腸道致病的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法) Maconkey Agar(without salt) 250

優(yōu)級(jí)胎牛血清 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 100毫升 Fetal bovine serum(Characterized FBS) BR

PABA培養(yǎng)基(真) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 PABA Medium(Fungi) 已經(jīng)磺胺類及類**的患者血液等標(biāo)本培養(yǎng)

產(chǎn)芽孢肉湯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 Sporulation Broth 產(chǎn)氣莢膜梭的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)

Tergitol-7瓊脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 250克 Tergitol-7 Agar 大腸群的鑒定

Stbl3大腸桿菌培養(yǎng)ITIH4  α胰蛋白酶重鏈H4抗體 0.2ml

CCL11/Eotaxin 1  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體 0.2ml

DISC1(NT)  DISC1 N端抗體 0.2ml

TREM1  髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體 0.2ml

AQP8/Aquaporin 8  水通道蛋白8抗體 0.2ml

CLK2  細(xì)胞分裂周期樣激酶2抗體 0.2ml

C2orf69  2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框69抗體 0.2ml

CACH6/Cav2.3  L型鈣通道蛋白a1亞型6抗體 0.2ml

PAPSS1  腺苷酸硫酸激酶1抗體 0.2ml

CYP8A1/PTGIS  前列環(huán)素合成酶抗體 0.1ml

IgHV/IgH  球蛋白重鏈可變區(qū)抗體 0.2ml

BNIP1/TRG8  Bcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白） 0.1ml

AMPK gamma 3/PRKAG3  腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體 0.2ml