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產(chǎn)品中心
產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法

  • 產(chǎn)品型號:BJ-01R3211
  • 產(chǎn)品**:邦景
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法不需要分離病毒培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
詳情介紹:

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;

②堿基配對原則;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

訂購信息:

產(chǎn)品名稱:鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法

英文名稱:Abalone Shriveling Syndromeassociated Virus(AbSV)PCR
貨號:BJ-01R3211

產(chǎn)品規(guī)格:50T

運輸:低溫

保存:負20度

有效期:一年

貨期:現(xiàn)貨

 

【儲存條件及有效期】:

-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。

【適用儀器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。

【樣本采集、存放及運輸】:

u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;

u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(多凍融3次);

u 運輸:采用**或泡沫箱加冰密封進行運輸。

本公司產(chǎn)品僅用于科研

【自備試劑】:

核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

1、 酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。


使用方法:

一、樣品 RNA 的制備

1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout

2、或柱式病毒 RNAout。

二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應合成 cDNA

1. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)

2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。

3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),

反應終體積為 20μL。

4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。

5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。

實驗注意事項:

1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;

2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;

3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括量和相對定量)和定性分析。

主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù):引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

5-Methoxy-2-benzimidazolethiol  5g  AL 8810 isopropyl ester  50mg  Deltaline  50mg

Ceramide  10mg  Galactose 1-phosphate Potassium salt  50mg  CMP-Sialic Acid (sodium salt)  500μg

TSU-68 (SU6668,Orantinib)  1mg  4-amino-1,8-Naphthalimide  10mg  Borrelia Bavarriensis 58  10mM(in1mLDMSO)

25-Hydroxycholesterol  10mg  Biricodar (VX-710)  10mM(in1mLDMSO)  Seviteronel racemate  25mg

LY2940680  10mg  Fradafiban (BIBU-52)  5mg  FAB-144  5μg

Lesopitron dihydrochloride (E4424)  50mg  N3PT  5mg  SHH Mouse  5mg

1,2,3-Trilinoelaidoyl-rac-glycerol  5μg  Heptadecanoyl Ethanolamide  1mg  HSPB11 Human  1mg

Nithiamide  5mg  JWH 018 N-(2,2-dimethylpropyl) isomer  20μg  GST  5g

NVP-TNKS656  100?  Lesinurad sodium  10mM*1mLinDMSO  17,20-dimethyl Prostaglandin F1α  50mg

H-Ala-OtBu.HCl  10mM(in1mLDMSO)  Homovanillic Acid sulfate (sodium salt)  10mg  Fesoterodine Fumarate  1g

NSP-805  10mM*1mLinDMSO  11-deoxy Prostaglandin E1  1mg  Memantine Lactose Adduct  1g

HSF1A  10mg  CCG 2046  10mg  Ro 15-4513  10mg

9(R)-HETE  2mg  PVALB Human  10mg  HPSE WB  1mg

Ac-Lys-NHMe  5mg  FASLG Human  1mg  ADX-47273  10μg

XAV-939  1mg  KCTD5 Human  10mg  Z-Phe-Phe-Phe-OH  1mg

鮑肌肉萎縮癥病毒熒光-PCR法染料木苷 英文名稱Genistin 含量:HPLC≥98% 20mg/支 γ-taxilin/LSR5  脂多糖相關(guān)反應蛋白5抗體 0.2ml

歐前胡素 英文名稱imperatorin 含量:HPLC≥98% 20mg/支 T4/L-Thyroxine  甲狀腺素T4抗體 0.2ml

異歐前胡素 英文名稱isoimperatorin 含量:HPLC≥98% 20mg/支 HLA G(N-Terminus)  人類白細胞抗原G抗體(N端) 0.1ml

遠志酸 英文名稱Polygalacic acid 含量:HPLC≥99% 20mg/支 HLA G(C-terminal)  人類白細胞抗原G抗體(C端) 0.1ml

遠志皂苷元 英文名稱Senegenin 含量:HPLC≥99% 20mg/支 hemagglutinin protein/H  麻疹病毒血凝素抗體 0.2ml

萊苞迪甙A 英文名稱Rebaudioside A  含量:HPLC≥98% 20mg/支 WIG-1/PAG608  野生型P53誘導基因1抗體 0.1ml

黃芩苷 英文名稱Baicalin 含量:HPLC≥98% 20mg/支 CD71/TFR/Transferrin receptor  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 0.1ml

野黃芩苷(燈盞花乙素) 英文名稱Scutellarin 含量:HPLC≥98% 20mg/支 GAPDH(3E12)-Loading Control  3-磷酸甘油醛脫氫酶單克隆抗體(內(nèi)參抗體) 0.1ml

黃芩素 英文名稱Baicalein 含量:HPLC≥98% 20mg/支 GAPDH   3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體(內(nèi)參抗體) 0.1ml


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