生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
NAD蘋果酸酶(NADME)生化試劑盒50管/48樣 |
紫外分光光度法 |
50管/48樣 |
BJ-0161121-50管/48樣 |
商品介紹:
測定意義:
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理:
NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
福爾馬林固定液(10%,RNase free) 500ml
甲醛明膠包被液(RNase free) 100ml
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Skepinone-L p38MAPK抑制劑(Skepinone-L) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Ehrlich蘇木素染色液 100ml|500ml
Dicoumarol 醌氧化還原酶1(NQO1)和PDK1抑制劑(Dicoumarol) 1mL(10mM)|100mg
Calcein-AM/PI Double Stain Kit Calcein-AM/PI活細胞/死細胞雙染試劑盒 500T
BMS-754807 胰島素受體抑制劑(BMS-754807) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
蕨類保存液 100ml
Colchicine 25ml
α-葡萄糖苷酶(α - GC)測試盒(可見分光光度法) 50管/24樣
HDAC-IN-1 HDAC-IN-1 1mL(10mM)|10mg|50mg
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒(微量法) 100管/48樣
Creatinine (Cr) Assay kit ( sarcosine oxidase ) 肌酐測定試劑盒(肌氨酸氧化酶法)(微板法) 96T
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兔p物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HGC-27胃癌細胞 Human
小鼠抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 U251膠質(zhì)瘤細胞 Human
豬胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HuH-7肝癌細胞 Human
大鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A549, 肺癌細胞系 Human
人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A-375 [A375], 惡性黑素瘤細胞株 Human
人環(huán)氧合酶2受體(COX-2R)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞 Mouse
人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 BxPC-3, 原位胰腺腺癌細胞株 Human
兔誘導型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 WM451, 黑色素瘤細胞 Human
大鼠CD163分子(CD163) Elisa試劑盒96T/48T試劑盒 Hela, 宮頸癌細胞系 Human
小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞 Rattus