操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
肌酸激酶(CK)生化試劑盒50管/48樣 |
紫外分光光度法 |
50管/48樣 |
BJ-0161123-50管/48樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義
CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中,能可逆地催化肌酸與ATP之間的轉(zhuǎn)磷酰基反應(yīng),在能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮和ATP再生中有重要作用,是臨床診斷心腦**的一個(gè)重要指標(biāo)。
測(cè)定原理
CK催化磷酸肌酸和ADP**肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP與葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化6-磷酸葡萄糖與NADP+**NADPH,導(dǎo)致340nm光吸收值增加。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
LPA2 antagonist 1 LPA2拮抗劑(LPA2 antagonist 1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
AP-III-a4 hydrochloride AP-III-a4 hydrochloride 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
Alkaline Phosphatase Assay Kit 堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒 100次
植物葉綠素(chlorophyll)含量測(cè)試盒(可見(jiàn)分光光度法) 50管/48樣
Ponceau S Staining Solution 麗春紅染色液 120ml
堿性磷酸酶(ALP)檢測(cè)試劑盒(PNP比色法) 60T
焦磷酸:果糖-6-磷酸-1-磷酸轉(zhuǎn)移酶(PFP)測(cè)試盒(紫外分光光度法) 50管/48樣
Calicheamicin DNA損傷細(xì)胞毒性試劑(Calicheamicin) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
硼酸緩沖鹽溶液(0.015mol/L,pH8.5) 500ml
BIIB021 HSP90抑制劑(BIIB021) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Cot inhibitor-1 COT/Tpl2抑制劑(Cot inhibitor-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
植物根系活力檢測(cè)試劑盒(萘胺微板法) 100T
PFK-015 PFKFB3抑制劑(PFK-015) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
VBY-825 cathepsin可逆抑制劑(VBY-825) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
肌酸激酶(CK)生化試劑盒50管/48樣人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MCF-7(MCF7)(ATCC來(lái)源), 癌細(xì)胞 Human
人氧還原蛋白過(guò)氧化物酶4(PRDX4)Elisa試劑盒96T/48T試劑盒 MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 癌細(xì)胞 Human
小鼠雌三醇(E3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Raji,Burkitt's**瘤細(xì)胞 Human
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Saos-2,成骨肉瘤細(xì)胞 Human
大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Caco-2,結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 Human
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 NCI-N87 [N87]胃癌細(xì)胞 Human
人蛋白磷酸酶(PP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MGC80-3(MGC-803)胃癌細(xì)胞 Human
人卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EC109,食管癌細(xì)胞 Human
人游離蛋白S(FP-S)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HGC-27胃癌細(xì)胞 Human
豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞 Human
小鼠高靈敏度促甲狀腺**(U-TSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AGS胃腺癌細(xì)胞 Human