操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
谷胱甘肽還原酶(GR)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-0161133-100管/96樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲(chóng)中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG**GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對(duì)活性氧**起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。
測(cè)定原理:
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)NADPH脫氫**NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長(zhǎng)無(wú)吸收峰;通過(guò)測(cè)定340 nm吸光度下降速率來(lái)測(cè)定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Salermide Sirt1andSirt2抑制劑(Salermide) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
H-1152 dihydrochloride Rho激酶抑制劑(H-1152 dihydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg
TBB 蛋白激酶CK2抑制劑(TBB) 1mL(10mM)|10mg|50mg
DAB chromogenic reagent kit For Western Blotting(with) Western Blotting DAB顯色法檢測(cè)試劑盒(藍(lán)色)(兔IgG) 1盒
LF3 β-Catenin/TCF4相互作用拮抗劑(LF3) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
KPT-8602 exportin-1抑制劑(KPT-8602) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
TCS-OX2-29 OX2受體拮抗劑(TCS-OX2-29) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Sofosbuvir impurity L HCVRNA復(fù)制抑制劑(Sofosbuvir impurity L) 1mL(10mM)|1mg|5mg
FAAH-IN-2 FAAH抑制劑(FAAH-IN-2) 1mL(10mM)|1g|5g
人CD3抑制劑 50mg
GSK1324726A BET蛋白抑制劑(GSK1324726A) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
I-CBP112 乙酰-賴氨酸競(jìng)爭(zhēng)性蛋白-蛋白相互作用抑制劑(I-CBP112) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
ENMD-2076 多靶點(diǎn)激酶抑制劑(ENMD-2076) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
SR9243 LXR反向激動(dòng)劑(SR9243) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
谷胱甘肽還原酶(GR)生化試劑盒(微量法)人循環(huán)**復(fù)合物(CIC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 QBC-939, 膽管癌細(xì)胞 Human
鴨胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 Mouse
大鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SGC-7901, 胃腺癌細(xì)胞系 Human
綿羊雌醇(E2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SK-N-SH, 神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 Human
人蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)天然蛋白 Native Advanced Glycation
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)
人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 腦型肌酸激酶(CKB)天然蛋白Native Creatine Kinase, Brain (CKB)
小鼠肝表達(dá)趨化因子(LEC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)天然蛋白 Native Glycated Hemoglobin A1c (HbA1c)
大鼠**球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 **球蛋白G1(IgG1)天然蛋白 Native Immunoglobulin G1 (IgG1)
植物乙烯(ETH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 血紅蛋白(HB)天然蛋白 Native Hemoglobin (HB)