操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-0161143-100管/96樣 |
商品介紹:
測定意義:
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG**GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧**起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-谷胱甘肽循環(huán)途徑。
測定原理:
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時NADPH脫氫**NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長無吸收峰;通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率,從而計算GR活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水
儀器:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
SGI-1027 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑(DNMT抑制劑) 1mL(10mM)|10mg|50mg
土壤羥胺還原酶(HR)測試盒(微量法) 100管/48樣
ATPase assay kit 超微量總ATP酶測定試劑盒(比色法) (測紅細胞)50管/25樣|(測紅細胞)100管/50樣|(測組織、普通細胞)100管/50樣|(測組織、普通細胞)50管/25樣
mAChR-IN-1 mAChR高效抑制劑(mAChR-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg
AP1903 HT1080凋亡誘導(dǎo)劑 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
己糖激酶(HK)測試盒(微量法) 100管/96樣
Ilaprazole H+/K+-ATPase抑制劑(Ilaprazole) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
BQR-695 PI4K抑制劑(BQR-695) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
Lys01 trihydrochloride 溶酶體自噬(lysosomal autophagy)抑制劑(Lys01 trihydrochloride) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
UNC0646 G9a抑制劑(UNC0646) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
RG14620 EGFR抑制劑(RG14620) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Bardoxolone methyl Nrf2激活劑(Bardoxolone methyl) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
Risedronic acid 骨重吸收抑制劑(Risedronic acid) 1mL(10mM)|100mg|500mg
鎂檢測試劑盒(Calmagite微板法) 100T
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)生化試劑盒(微量法)小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 補體成分3(C3)重組蛋白Recombinant Complement Component 3 (C3)
大鼠核因子kb(NF-kb)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 補體成分4a(C4a)重組蛋白Recombinant Complement Component 4a (C4a)
雞促生長**釋放**(GHRH)ELISA 試劑盒48T/96T試劑盒 補體成分7(C7)重組蛋白Recombinant Complement Component 7 (C7)
人補體片斷5b(C5b)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 補體受體2(CR2)重組蛋白Recombinant Complement Receptor 2 (CR2)
人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 補體因子H(CFH)重組蛋白Recombinant Complement Factor H (CFH)
人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 補體應(yīng)答基因32(RGC32)重組蛋白Recombinant Response Gene To Complement 32 (RGC32)
小鼠半糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)重組蛋白Recombinant Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1 (HNRPA2B1)
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 層粘連蛋白α1(LAMα1)重組蛋白Recombinant Laminin Alpha 1 (LAMa1)
大鼠膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 層粘連蛋白β1(LAMβ1)重組蛋白Recombinant Laminin Beta 1 (LAMb1)
人單純皰疹病毒抗原1(HSV-Ag1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 叉頭框蛋白O1(FOXO1)重組蛋白Recombinant Forkhead Box Protein O1 (FOXO1)
裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 層粘連蛋白受體1(LAMR1)重組蛋白Recombinant Laminin Receptor 1 (LAMR1)