操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主研發(fā),技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
過氧化氫酶(CAT)生化試劑盒(鉬酸銨比色法)(微量法) |
微量法 |
100管/48樣 |
BJ-0161148-100管/48樣 |
商品介紹:
測定意義:
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是*主要的H2O2**酶,在活性氧**系統(tǒng)中具有重要作用。
測定原理:
過氧化氫能氧化MoO42-成MoO52-,MoO52-接受氫氧根的電子成鍵,分子間立即脫水縮合,得到穩(wěn)定的黃色復(fù)合物(H2MoO4·XH2O)n在405nm處有強(qiáng)烈吸收峰,其吸光值和過氧化氫濃度成線性關(guān)系。測定出體系剩余過氧化氫在405nm的吸光值即可反映CAT的催化活性。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
DNA fragmentation Extraction Kit 細(xì)胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒 50次
CX-4945 sodium salt 蛋白激酶CK2抑制劑(CX-4945 sodium salt) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Western轉(zhuǎn)移緩沖液(10×) 500ml
Hemokinin 1 mouse neurokinin1 receptor激動(dòng)劑 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
PSN632408 GPR119受體激動(dòng)劑(PSN632408) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
AFN-1252 FabI抑制劑(AFN-1252) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
PCNA cell proliferation Detection Kit PCNA細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法) 20T
ML228 HIF信號通路活化劑(ML228) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
666-15 CREB抑制劑(666-15) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg
過氧化氫酶(CAT)測試盒(微量法) 100管/96樣
活細(xì)胞核酸染料-綠菁SYT 500μL
酸性固綠染色液 2×50ml
丙二醛(MDA)測試盒(可見分光光度法) 50管/48樣
Valpromide 人類環(huán)氧化物水解酶抑制劑(Valpromide) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
過氧化氫酶(CAT)生化試劑盒(鉬酸銨比色法)(微量法)人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 干擾素γ(IFNγ)重組蛋白Recombinant Interferon Gamma (IFNg)
人頭瘤病毒16(HPV-16)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 干擾素誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)關(guān)聯(lián)病毒抑制蛋白(Viperin)重組蛋白Recombinant Virus Inhibitory Protein (Viperin)
兔內(nèi)皮素(Endothelin-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 干細(xì)胞因子(SCF)重組蛋白Recombinant Stem Cell Factor (SCF)
小鼠粒細(xì)胞集落激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 甘丙肽(GAL)重組蛋白Recombinant Galanin (GAL)
大鼠1,25羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲氨酸蛋白酶2(MASP2)重組蛋白Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)
大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)
人c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 甘露糖受體C2(MRC2)重組蛋白Recombinant Mannose Receptor C Type 2 (MRC2)
人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 甘油磷酸肌醇錨定高密度脂蛋白結(jié)合蛋白1(GPIHBP1)重組蛋白Recombinant Glycosylphosphatidylinositol Anchored High Density Lipoprotein Binding Protein 1 (GPIHBP1)
人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP) ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肝腎骨堿性磷酸酶(ALPL)重組蛋白Recombinant Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL)
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肝素酶(HPA)重組蛋白Recombinant Heparanase (HPA)
兔子白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)重組蛋白Recombinant Heparin Cofactor II (HCII)