操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
非蛋白質(zhì)巰基生化試劑盒50管/24樣 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
BJ-0161180-50管/24樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的**功能,對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。
測(cè)定原理:
巰基基團(tuán)與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),**黃色化合物,在412nm處有*大吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
天平、研缽、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水,甲醇。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Diclofensine hydrochloride 單胺再攝取抑制劑 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Acebilustat 白三烯A4水解酶抑制劑(Acebilustat) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg
Trilostane 3β-羥化類固醇脫氫酶抑制劑(Trilostane) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Protease inhibitor Cocktail 蛋白酶抑制劑混合液(100×PIC) 1ml
CPI-169 racemate EZH2抑制劑(CPI-169 racemate) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
醋酸洋紅染色液 50ml|100ml
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)檢測(cè)試劑盒(PNP微板法) 120T
土壤脫氫酶(SDHA)測(cè)試盒(可見分光光度法) 50管/24樣
Endogenous carbon monoxide assay kit 內(nèi)源性一氧化碳測(cè)定試劑盒(測(cè)組織)(比色法) 50管/48樣
BCIP/NBT Immunohistochemistry Color Development Kit BCIP/NBT**組織化學(xué)顯色試劑盒 100次|500次|1000次
蘋果酸脫氫酶(MDH)檢測(cè)試劑盒(OAA比色法) 50T
Captopril ACE抑制劑(Captopril) 1mL(10mM)|100mg|500mg
GSK583 RIP2Kinase抑制劑(GSK583) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
ARRY-520 R enantiomer KSP抑制劑(ARRY-520 R enantiomer) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
非蛋白質(zhì)巰基生化試劑盒50管/24樣小鼠酪蛋白酶ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 CNE1, 鼻咽癌細(xì)胞系
大豆凝集素(SBA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CNE-2Z(鼻咽癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CoC1(卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人c-jun ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 CoC1/DDP(卵巢耐藥細(xì)胞亞株)5×106cells/瓶×2
人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 201(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人食欲素受體(OXR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 205(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
兔子白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 320(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO 320DM(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COLO全細(xì)胞裂解液100μg100μg
人TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COS-1(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠煙酰胺腺嘌呤核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 COS/猴腎細(xì)胞株株國(guó)產(chǎn)