操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主研發(fā),技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
谷氨酸合成酶(GOGAT)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-0161190-100管/96樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
GOGAT廣泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。GOGAT分為以NADH為還原劑的NADH-GOGAT和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于葉綠體基質(zhì)中,與光合作用和光呼吸有關(guān),主要同化NO3-還原和光呼吸產(chǎn)生的NH4+。
測(cè)定原理:
Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸,谷氨酸脫氫酶催化谷氨酸的脫氫反應(yīng),同時(shí)產(chǎn)生NADH,使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。
需自備的儀器和用品:
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
土壤漆酶測(cè)試盒(微量法) 100管/48樣
Eosin Staining Solution 伊紅染色液 100ml
Abacavir sulfate 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(Abacavir sulfate) 1mL(10mM)|10mg|50mg
K-Ras-IN-1 K-ras抑制劑(K-Ras-IN-1) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Bitopertin glycine reuptake抑制劑(Bitopertin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
CAY10603 HDAC6抑制劑(CAY10603) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
尿酸(UA)含量測(cè)試盒(可見(jiàn)分光光度法) 50管/48樣
ML-098 GTP結(jié)合蛋白Rab7激活劑(ML-098) 1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg
AVL-292 Btk激酶活性抑制劑(AVL-292) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Hydroxyl Free Radical assay kit 羥自由基測(cè)試試劑盒 50管/48樣
Estramustine phosphate sodium Estramustine phosphate sodium 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Double chromogenic Immunofluorescence kit for rat IgG(Cy3&POD) 雙顯色抗大鼠IgG**組化試劑盒CY3和過(guò)氧化物酶 1ml|2ml|5ml
Phenelzine sulfate MAOI抑制劑(Phenelzine sulfate) 1mL(10mM)|100mg|500mg
Taltobulin Taltobulin 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
谷氨酸合成酶(GOGAT)生化試劑盒(微量法)大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 JEG-3(絨毛膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 JeKo-1(套細(xì)胞**瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Jurkat, Clone E6-1 (急性T**細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Jurkat/外周血白血病T細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Jurkat全細(xì)胞裂解液100μg國(guó)產(chǎn)
鴨白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 K-562(慢性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 K562/慢性髓性白血病細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
人抗斑疹傷寒抗體(anti-typhus-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 K562全細(xì)胞裂解液100μg100μg
人未磷酸化類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠維生素D(VD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 KATO III(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 kasumi-1, 白血病細(xì)胞株