操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
谷氨酰胺合成酶(GS)生化試劑盒50管/24樣 |
可見(jiàn)分光光度法 |
50管/24樣 |
BJ-01611110-50管/24樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過(guò)多的銨離子對(duì)生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。
測(cè)定原理
GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm處有*大吸收峰,可用分光光度計(jì)測(cè)定。
所需的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿(mǎn)意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
電鏡脫鈣液 100ml|500ml
APES防脫劑 10ml|100ml
Reactive Oxygen Species Assay Kit 活性氧檢測(cè)試劑盒(ROS) 100T
MTS細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒 500T
Giemsa Stain Solution 吉姆薩染色液 100ml
DGAT-1 inhibitor 2 DGAT-1抑制劑(DGAT-1 inhibitor 2) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
Ribocil GFP表達(dá)抑制劑(Ribocil) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
MK-8033 hydrochloride c-Met/Ron雙重抑制劑(MK-8033 hydrochloride) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
Dolutegravir HIV-1整合酶抑制劑(Dolutegravir) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
LDK378 dihydrochloride ALK抑制劑(LDK378 2Hcl) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
H+、K+-ATPase assay kit 氫-鉀ATP酶(H+、K+-ATPase)試劑盒 200管/96樣|100管/48樣
Reparixin CXCL8受體CXCR1/2變構(gòu)抑制劑(Reparixin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
7-amino-actinomycin D 死細(xì)胞核7-AAD染料 1mg
Potassium Assay Kit 鉀測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn))比色法(半自動(dòng)生化儀) 30管/25樣
谷氨酰胺合成酶(GS)生化試劑盒50管/24樣大鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SKOV3/Taxol-25, 卵巢癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株
大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMC-1(胸膜瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7221/肝癌細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7221全細(xì)胞裂解液100ug100ug
人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SMMC-7721(肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
兔子血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SNU-5(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
大鼠表皮生長(zhǎng)因子受體2(Her2)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 SP Mouse HRP Kit/鼠Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)/兔&鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
人抗核周因子抗體(APF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit HRP Kit(DAB)/兔Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)
人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 SP Rabbit & Mouse HRP Kit、兔/鼠通用型Streptavidin-HRP試劑盒3ml、18ml國(guó)產(chǎn)