操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/48樣 |
BJ-01611114-100管/48樣 |
商品介紹:
測定意義:
脯氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯氨酸代謝因其初始底物不同,分為谷氨酸( Glu) 和鳥氨酸( Orn) 兩條合成途徑。吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS, Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase)是以谷氨酸為前體合成脯氨酸途徑的關(guān)鍵酶,對植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。
測定原理:
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸**P5C過程中分解ATP**ADP和無機(jī)磷,通過鉬酸銨比色法測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生無機(jī)磷的量可確定P5CS活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
儀器:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
BIBR 1532 telomerase抑制劑(BIBR 1532) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Betulin SREBP抑制劑(Betulin) 1mL(10mM)|50mg|100mg|200mg
蘇木素?zé)o水乙醇溶液(10%) 100ml
GSK-J4 H3K27me3demethylase抑制劑(GSK-J4) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Chlorambucil Chlorambucil 1mL(10mM)|100mg|500mg
輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒(微量法) 100管/48樣
Ultra sensitive Immunohistochemistry Kit (anti-rabbit&mouse IgG) 超靈敏抗小鼠/兔IgG**組化試劑盒 3ml|6ml|12ml|50ml
CX546 AMPAR受體激動劑(CX546) 1mL(10mM)|10mg|50mg
Mazindol 食欲抑制劑(Mazindol) 1mL(10mM)|50mg|100mg
Astragalus polysaccharide PPAR-γ和PI3K/Akt激活劑 50mg
T0901317 LXR和FXR激動劑(T0901317) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
CCT129202 Aurora A/Aurora B和Aurora C抑制劑(CCT129202) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Chitinase-IN-1 殼聚糖酶和乙酰氨基己糖苷酶抑制劑(Chitinase-IN-1) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
幽門螺旋桿菌染色液(MGG法) 2×100ml
吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)生化試劑盒(微量法)人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U-2 OS, 骨肉瘤細(xì)胞
小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 U251(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞
大鼠端粒酶(TE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U266B1 [U266], 多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U-87 MG(神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U-937(組織細(xì)胞**瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人抗上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 U937/髓系白血病細(xì)胞株國產(chǎn)
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 UACC-812(導(dǎo)管瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 UM-UC-3, 膀胱移行細(xì)胞癌
組裝/原裝 UM-UC-3(膀胱移行細(xì)胞癌)5×106cells/瓶×2