操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
線粒體檸檬酸(MCA)含量生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-01611147-100管/96樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
CA是線粒體三羧酸循環(huán)的**個(gè)中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。
配合測(cè)定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。
測(cè)定原理:
CA在檸檬酸裂解酶的作用下,**α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),**相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長(zhǎng)下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
微波輻射抗原修復(fù)試劑盒 2×100ml
堿性磷酸酶測(cè)試盒(AKP) 48T
NFAT Inhibitor NFAT抑制劑(NFAT Inhibitor) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
中性甲醛鈣固定液(10%) 500ml
GSK269962A ROCK抑制劑(GSK269962A) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
KIRA6 IRE1α RNase激酶抑制劑(KIRA6) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg
PCI-34051 HDAC8抑制劑(PCI-34051) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
PCI-32765 Btk抑制劑(PCI-32765) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
Nifuroxazide STAT抑制劑(Nifuroxazide) 1mL(10mM)|200mg|500mg
標(biāo)準(zhǔn)革蘭氏染色液 4×10ml|4×100ml|4×250ml|4×500ml
Cebranopadol ((1α,4α)stereoisomer) ORL-1激活劑 1mL(10mM)|2mg|5mg
western轉(zhuǎn)移緩沖液(尼龍膜) 500ml
MHP SPHK1激活劑(MHP) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|20mg
1-Deoxynojirimycin α葡萄糖苷酶抑制劑(1-Deoxynojirimycin) 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
線粒體檸檬酸(MCA)含量生化試劑盒(微量法)小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病克隆細(xì)胞系英文名稱:L6565
小鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:P388
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
雞催素(PRL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:L1210
人不對(duì)稱甲基氨酸(ADMA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1
人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:L1210
人血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:P388
小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱:NFS-60
植物草酸氧化酶(OxO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱:NFS-60
犬促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠可溶性瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠表皮黑色素細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL