操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
α淀粉酶生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/48樣 |
BJ-01611205-100管/48樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
淀粉水解酶,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-AL (EC 3.2.1.1)隨機(jī)催化淀粉中α-1,4-糖苷鍵水解,**葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
測(cè)定原理:
淀粉水解酶催化淀粉水解**還原糖,還原糖還原3,5-二硝基水楊酸**棕紅色物質(zhì),在540 nm有吸收峰;通過測(cè)定540 nm吸光度增加速率,計(jì)算淀粉酶活性。α-AL耐熱,但是β-淀粉酶可在70℃鈍化15min。因此粗酶液經(jīng)過70℃鈍化15min,就只有α-AL能夠催化淀粉水解。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Western半干法轉(zhuǎn)膜液(固體)(10×干粉) 1包
GNE-7915 tosylate LRRK2抑制劑(GNE-7915 tosylate) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
蛋白質(zhì)銀染檢測(cè)試劑 40次
Cinacalcet hydrochloride CaR激動(dòng)劑(Cinacalcet hydrochloride) 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
吲哚乙酸氧化酶檢測(cè)試劑盒(IAA比色法) 50T
乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒(LD-P比色法) 100T
油紅O異丙醇飽和液 100ml
細(xì)胞核染料DAPI 10mg|1mg
土壤羥胺還原酶(HR)測(cè)試盒(可見分光光度法) 50管/24樣
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒 50次
Kisser封片劑(Phenol free) 10ml|50ml
Pirfenidone TGF-β前體蛋白抑制劑(Pirfenidone) 1mL(10mM)|100mg|500mg|1g|5g
NS-018 maleate JAK2抑制劑(NS-018 maleate) 1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
PF-4989216 PI3K抑制劑(PF-4989216) 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
α淀粉酶生化試劑盒(微量法)大鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
人骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人醛固酮(ALD)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 IV型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
兔白細(xì)胞介素-35(IL-35)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 IV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
豬乙型腦炎病毒抗體IgG ELISA試劑盒48T/96T試劑盒 中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
大鼠維生素B12(VB12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL