操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
α半乳糖苷酶(αGAL)生化試劑盒50管/24樣 |
可見分光光度法 |
50管/24樣 |
BJ-01611244-50管/24樣 |
商品介紹:
測定意義
α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供*初的能量來源,后期則主要參與細胞壁儲藏多糖水解。測定原理α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷**對-硝基苯酚,后者在400nm有*大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。自備用品可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
特點:
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致公認是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
AMA 大鼠抗心肌抗體ELISA檢測試劑盒 AMA ELISA Kit
CFH 小鼠補體因子HELISA檢測試劑盒 CFH ELISA Kit
小鼠**細胞因子ELISA試劑盒 lymphocyte factor ELISA Kit
omentin 小鼠網(wǎng)膜素ELISA檢測試劑盒 omentin ELISA Kit
PF-3 小鼠血小板因子3ELISA檢測試劑盒 PF-3 ELISA Kit
HSF1 小鼠熱休克因子1ELISA檢測試劑盒 HSF1 ELISA Kit
sLR 大鼠可溶性瘦素受體ELISA檢測試劑盒 sLR ELISA Kit
C-Peptide 大鼠C肽ELISA檢測試劑盒 C-Peptide ELISA Kit
T3 大鼠三碘甲狀腺原ELISA檢測試劑盒 T3 ELISA Kit
LH 大鼠促黃體**ELISA檢測試劑盒 LH ELISA Kit
α半乳糖苷酶(αGAL)生化試劑盒50管/24樣2 ug pCMV-VSV-G pCMV-VSV-G 低溫運輸,-20℃保存
肉湯基礎(chǔ) Lysozyme Broth Base 250g
2 ug pCMV6 entry pCMV6 entry 低溫運輸,-20℃保存
50T 山羊關(guān)節(jié)炎腦炎病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
5 mg Nocodazole (有絲分裂抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL FCS Blocking Buffer in PBS FCS Blocking Buffer in PBS 常溫保存
50mL 即用型封堵液(Nylon專用) Southern Blocking Buffer (Nylon) -20℃保存
2 ug pADH2 pADH2 低溫運輸,-20℃保存
莢膜染色液 5ml*4
1瓶 LNcap cloneFGC細胞株 LNcap cloneFGC 低溫運輸和保存
2216E瓊脂 2216E Agar 250g