生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
葡萄糖脫氫酶(GCDH)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-01611253-100管/96樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義:
GCDH(EC 1.1.1.47)催化D-葡萄糖和NAD(P)**D-葡萄糖酸和NAD(P)H,大量存在于高等動(dòng)物的肝臟和弱氧化醋桿菌中。在低聚果糖生產(chǎn)中使用GCDH,不僅能去除低聚果糖中的葡萄糖提高低聚果糖的含量,而且**的葡萄糖酸與鈣離子結(jié)合**的葡萄糖酸鈣是一種理
想的補(bǔ)鈣制劑。因而,GCDH已成為制備高含量低聚果糖的理想用酶。
測(cè)定原理:
GCDH催化D-葡萄糖和NAD**D-葡萄糖酸和NADH,在340nm下測(cè)定NADH上升速率,即可反映GCDH活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
NGF 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子ELISA檢測(cè)試劑盒 NGF ELISA Kit
NT-3 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3ELISA檢測(cè)試劑盒 NT-3 ELISA Kit
NT-4 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4ELISA檢測(cè)試劑盒 NT-4 ELISA Kit
PF-3 大鼠血小板因子3ELISA檢測(cè)試劑盒 PF-3 ELISA Kit
IL-9 大鼠白介素9ELISA檢測(cè)試劑盒 IL-9 ELISA Kit
AR 大鼠角化細(xì)胞***因子ELISA檢測(cè)試劑盒 AR ELISA Kit
ANG-1 大鼠血管**素1ELISA檢測(cè)試劑盒 ANG-1 ELISA Kit
EPO 大鼠紅細(xì)胞**素ELISA檢測(cè)試劑盒 EPO ELISA Kit
TPO 大鼠血小板**素ELISA檢測(cè)試劑盒 TPO ELISA Kit
SCFR 大鼠干細(xì)胞因子受體ELISA檢測(cè)試劑盒 SCFR ELISA Kit
葡萄糖脫氫酶(GCDH)生化試劑盒(微量法)100U Therminator II DNA 聚合 Therminator II DNA Polymerase -20℃保存
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH9.5 Phosphate Buffer,0.2M, pH9.5 常溫保存
100次 DNA快速連接試劑盒 Rapid DNA Ligation Kit -20℃保存
2 ug pOTB7 FKBP4 pOTB7 FKBP4 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
3%NaCl 20支
1瓶 V79細(xì)胞株 V79 低溫運(yùn)輸和保存
4次 大提柱式**DNAout Maxi Column Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存)
2 ug pET-12a pET-12a 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
酸性肉湯 Acid Borth 250g
1瓶 293 001B細(xì)胞株 293 001B 低溫運(yùn)輸和保存
96支 200 μL RNase-free 黃吸頭(盒裝) 常溫