操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡(jiǎn)便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測(cè)定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/48樣 |
BJ-01611299-100管/48樣 |
商品介紹:
測(cè)定意義
土壤亞硝酸還原酶是反硝化作用中的關(guān)鍵酶之一,參與亞硝酸鹽至NO的還原反應(yīng),它的活性反映了生物降解過(guò)程中氮素的轉(zhuǎn)化效率,為氮素轉(zhuǎn)化規(guī)律的研究提供一定的依據(jù)。
測(cè)定原理
亞硝酸還原酶可將NO2—還原為NO,使樣品中參與重氮化反應(yīng)**紫紅色化合物的NO2—減少,即540nm處吸光值的變化可反應(yīng)土壤中亞硝酸還原酶的活性。
需自備的儀器和用品
天平、、研缽、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、低溫離心機(jī)。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
類白細(xì)胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒 leukocyte antigen C,HLA-C ELISA Kit
類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒 leukocyte antigen A,HLA-A ELISA Kit
雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit
酪氨酰tRNA合成酶(YARS)ELISA試劑盒 tyrosyl-tRNA synthetase,YARS ELISA kit
狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 lupus anticoagulant,LAC/LA ELISA Kit
蘭尼堿受體2(RYR2)ELISA試劑盒 RYR2 ELISA Kit
蘭尼堿抗體ELISA試劑盒 anti-ryanodine antibody ELISA Kit
賴氨酰氧化酶(LOX)ELISA試劑盒 Protein-lysine 6-oxidase(LOX) ELISA kit
萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 Lyme IgG ELISA Kit
醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒 NAD (P)H Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)ELISA Kit
土壤亞硝酸還原酶(SNiR)生化試劑盒(微量法)WDR79/TCAB1 端??ü栿w蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Gamma-Adaptin/γ-Adaptin 銜接蛋白γ抗體 規(guī)格: 0.1ml
S100P S100鈣結(jié)合蛋白P抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-alpha Adducin(Ser726) 磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化苷單磷酸活化蛋白激α1抗體 規(guī)格: 0.1ml
HCLS1/LckBP1 造干細(xì)胞特異性蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
UQCRC2 線粒體輔還原核心蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
CCAP/Cardioactive Peptide 心動(dòng)加速蛋白多肽抗體 規(guī)格: 0.2ml
FBXO18 F-box蛋白家族FBXO18抗體 規(guī)格: 0.2ml
PAX3 配對(duì)盒基因3抗體 規(guī)格: 0.1ml
HOMER3 HOMER3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
TRPC6 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白6抗體 規(guī)格: 0.1ml