操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主研發(fā),技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊,操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號 |
4香豆酸:輔酶A連接酶(4CL)生化試劑盒(微量法) |
微量法 |
100管/96樣 |
BJ-01611349-100管/96樣 |
商品介紹:
測定意義:
4CL是連接苯丙酸途徑與木質(zhì)素特異合成途徑的關(guān)鍵酶,主要催化肉桂酸生成相應(yīng)的肉桂酸輔酶A酯,是合成木質(zhì)素與其他苯丙烷類化合物的代謝流向調(diào)控點(diǎn)。該酶主要存在于高等植物、酵母和菌類中,研究該酶可以探討多種生物細(xì)胞發(fā)育過程中木質(zhì)素沉積的代謝機(jī)理,為減少水果石細(xì)胞含量而提高其品質(zhì)提供依據(jù)。
測定原理:
4CL催化4-香豆酸和CoA生成4-香豆酸CoA,在333nm下測4-香豆酸CoA生成速率,即可反映4CL活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研缽、冰和蒸餾水。
儀器:
1、分光光度計/酶標(biāo)儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
組織蛋白酶K(CTSK)ELISA試劑盒 Cathepsin K(CTSK)ELISA Kit
組織蛋白酶G(CTSG)ELISA試劑盒 Cathepsin G(CTSG)ELISA Kit
組織蛋白酶F(CTSF)ELISA試劑盒 Cathepsin F(CTSF)ELISA Kit
組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 Cathepsin D(CTSD)ELISA Kit
組織蛋白酶A(CTSA)ELISA試劑盒 Cathepsin A(CTSA)ELISA Kit
組蛋白乙?;D(zhuǎn)移酶1(HAT1)ELISA試劑盒 Histone Acetyltransferase 1(HAT1)ELISA Kit
組蛋白脫乙?;?/span>9(HDAC9)ELISA試劑盒 Histone Deacetylase 9(HDAC9)ELISA Kit
組蛋白脫乙?;?/span>8(HDAC8)ELISA試劑盒 Histone Deacetylase 8(HDAC8)ELISA Kit
組蛋白脫乙?;?/span>7(HDAC7)ELISA試劑盒 Histone Deacetylase 7(HDAC7)ELISA Kit
組蛋白脫乙酰基酶6(HDAC6)ELISA試劑盒 Histone Deacetylase 6(HDAC6)ELISA Kit
4香豆酸:輔酶A連接酶(4CL)生化試劑盒(微量法)JYBL-Ⅰ脫鈣液500ml
JYBL-Ⅱ脫鈣液500ml
JYBL-Ⅳ脫鈣液500ml
電解脫鈣液(甲酸法)500ml
JYBL-Ⅲ脫鈣液500ml
電鏡脫鈣液100ml|500ml
脫鈣后堿處理液500ml
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液3×10ml|3×20ml
酸性磷酸酶染色液(偶氮偶聯(lián)法)3×10ml|3×20ml
β-半乳糖苷酶染色試劑盒(細(xì)胞專用)100T