操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
生化法檢測試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主**,技術(shù)**團(tuán)隊(duì),操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,是廣大科研工作者的好選擇。
產(chǎn)品名稱 |
測定方法 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)生化試劑盒50管/48樣 |
紫外分光光度法 |
50管/48樣 |
BJ-01611391-50管/48樣 |
商品介紹:
測定意義
磷酸丙糖異構(gòu)酶是重要的糖酵解酶,廣泛存在于動(dòng)植物及微生物體內(nèi),在機(jī)體內(nèi)參與葡萄糖代謝,在糖酵解,糖異生、脂肪酸生物合成及磷酸戊糖代謝中都發(fā)揮著重要作用。
測定原理
磷酸丙糖異構(gòu)酶將磷酸二羥丙酮轉(zhuǎn)化為3-磷酸甘油醛,3-磷酸甘油醛與NAD在3-磷酸甘油醛脫氫酶的作用下**3-磷酸甘油酸和NADH,340nm處的吸光度變化反映了磷酸丙糖異構(gòu)酶的活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。
儀器:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺(tái)式離心機(jī)
4、漩渦混勻器
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
突觸蛋白Ⅲ(SYN3)ELISA試劑盒 Synapsin III(SYN3)ELISA Kit
突觸蛋白Ⅱ(SYN2)ELISA試劑盒 Synapsin II(SYN2)ELISA Kit
突觸蛋白Ⅰ(SYN1)ELISA試劑盒 Synapsin I(SYN1)ELISA Kit
透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)ELISA試劑盒 Hyaluronan Binding Protein 1(HABP1)ELISA Kit
透明質(zhì)酸合酶3(HAS3)ELISA試劑盒 Hyaluronan Synthase 3(HAS3)ELISA Kit
透明質(zhì)酸合酶2(HAS2)ELISA試劑盒 Hyaluronan Synthase 2(HAS2)ELISA Kit
透明質(zhì)酸合酶1(HAS1)ELISA試劑盒 Hyaluronan Synthase 1(HAS1)ELISA Kit
頭蛋白(NOG)ELISA試劑盒 Noggin(NOG)ELISA Kit
酮戊二酸脫氫酶(OGDH)ELISA試劑盒 Oxoglutarate Dehydrogenase(OGDH)ELISA Kit
酮戊二酸受體1(OXGR1)ELISA試劑盒 Oxoglutarate Receptor 1(OXGR1)ELISA Kit
磷酸丙糖異構(gòu)酶(TPI)生化試劑盒50管/48樣p70核糖體S6激酶1抑制劑(S6K1抑制劑)(PF-4708671)PF-47086711mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
Hsp90抑制劑Alvespimycin hydrochloride1mL(10mM)|10mg|25mg|100mg|200mg|500mg
ROCK激酶抑制劑(K-115)K-1151mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
eIF4E與eIF4G的相互作用抑制劑(4E1RCat)4E1RCat1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
c-Raf抑制劑(GW 5074)GW 50741mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
Aurora A和Aurora B抑制劑(ZM447439)ZM-4474391mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
VEGFR1/VEGFR2/VEGFR3抑制劑(Motesanib)Motesanib1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
HDAC6抑制劑Tubastatin A Hydrochloride1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
HDAC抑制劑Sodium phenylbutyrate1mL(10mM)|100mg|200mg
c-Met/ALK抑制劑Crizotinib hydrochloride1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg