一抗操作步驟:
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉:?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點與抗體結(jié)合,?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來封閉膜上的未結(jié)合位點,?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉,?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動1~2小時,?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進行洗膜,?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育:?在一抗孵育之前,?需要參考一抗的說明書,?按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后,?立即加入稀釋好的一抗,?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動孵育1~2小時。?如果一抗孵育一小時效果不佳,?可以在4℃緩慢搖動孵育過夜。?然后回收一抗,?加入Western洗滌液,?在搖床上緩慢搖動洗滌5-10分鐘,?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高,?可以適當(dāng)延長洗滌時間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌:?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合,?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液,?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合,?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時間根據(jù)具體實驗來確定,?建議清洗3-5次,?每次5分鐘。
貨號 |
規(guī)格 |
價格 |
用途 |
BJ006152 |
50ul |
1380 |
僅供科研實驗 |
BJ006152 |
100ul |
2380 |
僅供科研實驗 |
BJ006152 |
200ul |
3480 |
僅供科研實驗 |
商品屬性:
英文名稱:C16orf5
中文名稱:細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白抗體
別 名;CDIP; Cell death inducing protein; Cell
death-inducing protein; Chromosome 16 open reading frame 5; I1 antibody LITAF
like protein; LITAF-like protein; LITFL_HUMAN; Transmembrane protein I1.
研究領(lǐng)域;細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 表觀遺傳學(xué)
抗體來源;Rabbit
克隆類型;Polyclonal
交叉反應(yīng); Rat, (predicted: Human, Mouse, Chicken, Dog, Cow,
Horse, Rabbit, )
產(chǎn)品應(yīng)用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量;22kDa
細(xì)胞定位;細(xì)胞漿
性 狀;Liquid
濃 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human C16orf5: 101-200/208
亞 型;IgG
純化方法;affinity purified by Protein A
保存條件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗體注意事項:
確定抗體的名字和特性:?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息,?這些信息對于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實驗類型:?了解你的實驗類型(?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS)?,?因為抗體的說明書通常會列出該抗體經(jīng)驗證過的實驗類型。?如果說明書沒有提及某種應(yīng)用類型,?并不意味著該抗體不適用于該實驗,?只是表示尚未經(jīng)過該實驗驗證。?
選擇適當(dāng)?shù)膶嶒灅颖痉N屬:?確定你的實驗樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等,?因為抗體的說明書會列出該抗體經(jīng)試驗驗證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì):?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體,?特別是當(dāng)樣本蛋白在提取和處理過程中可能會變性時,?這會影響抗體的親和反應(yīng)。?
單多克隆抗體的選擇:?單克隆抗體特異性強但親和力相對小,?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強。?根據(jù)實驗需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性:?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應(yīng)選擇針對已充分表征的原產(chǎn)生的抗體,?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇:?封閉液的選擇應(yīng)根據(jù)抗體說明書進行,?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點,?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項:?使用干凈的孵育盒子,?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號。?如果一次性需要檢測多個蛋白,?可以考慮將膜剪開或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
公司正在銷售的產(chǎn)品:
ACV-AELISAKit |
大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(AANAT)elisa檢測試劑盒 |
猴胰島素(INS)elisa分析檢測試劑盒 |
調(diào)料總?cè)樗岜壬ǘ繖z測試劑盒 |
INS ELISA Kit |
POMZP3蛋白抗體 |
人肥大細(xì)胞類胰凝乳蛋白酶elisa分析檢測試劑盒 |
POMZP3 |
馬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠P53elisa檢測試劑盒 |
HumanMastCellChymaseELISAKit |
CD20樣蛋白2抗體 |
石蠟切片組織RHO 蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
CD20L2/MS4A5 |
5×Tris-Glycine緩沖液 500ml |
紅細(xì)胞磷脂酰肌醇聚糖A抗體 Anti-PIGA |
小鼠核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)elisa分析檢測試劑盒 |
阿黑皮素原抗體 Anti-POMC |
白介素26抗體 |
泛素樣蛋白7抗體 Anti-UBL7 |
IL26 |
剪接體相關(guān)蛋白62抗體 Anti-SAP62 |
可溶性附著蛋白α-SNAP抗體 |
Cy3標(biāo)記的羊抗大鼠IgG H&L |
Alpha SNAP |
Goat Anti-Rat IgG H&L / Cy3 |
豬凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)elisa檢測試劑盒 |
神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白抗體 |
細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白抗體Maxi Potassium channel alpha; bA205K10.1; BK channel; BKCa channels; BKCA alpha; BKCA alpha subunit; BKTM; Calcium activated potassium channel subfamily M subunit alpha 1; Calcium activated potassium channel subunit alpha 1; DKFZp686K1437; Drosophila slowpoke like; hSlo; K(VCA)alpha; KCa1.1; KCNMA 1; KCNMA; KCNMA1; Large conductance calcium activated potassium channel subfamily M alpha member 1; Maxi K; Maxi K channel; MaxiK; Potassium large conductance calcium activated channel subfamily M alpha member 1; SAKCA; Slo 1; SLO alpha; SLO; Slo homolog; Slo1; Slowpoke homolog; Stretch activated Kca channel; KCMA1_HUMAN. |