一抗操作步驟:
一抗的操作步驟主要包括封閉、?一抗孵育和洗滌。?
封閉:?這一步驟的目的是為了防止非特異性的蛋白質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)與抗體結(jié)合,?從而引起非特異的染色和背景。?通常使用惰性蛋白質(zhì)或非離子去污劑來封閉膜上的未結(jié)合位點(diǎn),?以降低抗體的非特異性結(jié)合。?常用的封閉試劑有5%的BSA或脫脂奶粉,?緩沖液一般選擇PBST或TBST。?封閉條件通常為室溫或37℃緩慢搖動(dòng)1~2小時(shí),?特殊情況也可4℃過夜。?封閉完成后需要進(jìn)行洗膜,?以去除膜上未結(jié)合的封閉試劑。?
一抗孵育:?在一抗孵育之前,?需要參考一抗的說明書,?按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋一抗。?吸盡封閉液后,?立即加入稀釋好的一抗,?室溫或4℃在搖床上緩慢搖動(dòng)孵育1~2小時(shí)。?如果一抗孵育一小時(shí)效果不佳,?可以在4℃緩慢搖動(dòng)孵育過夜。?然后回收一抗,?加入Western洗滌液,?在搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5-10分鐘,?共洗滌3次。?如果結(jié)果背景較高,?可以適當(dāng)延長洗滌時(shí)間并增加洗滌次數(shù)。?
洗滌:?洗滌的目的是為了洗去一抗的非特異性結(jié)合,?洗滌的效果直接影響結(jié)果背景的深淺。?建議使用PBST或TBST作為洗滌液,?其中的Tween20有助于去除非特異性的結(jié)合,?減少背景。?洗滌的次數(shù)和時(shí)間根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)來確定,?建議清洗3-5次,?每次5分鐘。
貨號 |
規(guī)格 |
價(jià)格 |
用途 |
BJ003747 |
50ul |
1380 |
僅供科研實(shí)驗(yàn) |
BJ003747 |
100ul |
2380 |
僅供科研實(shí)驗(yàn) |
BJ003747 |
200ul |
3480 |
僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品屬性:
英文名稱:ACADS
中文名稱:?;o酶A脫氫酶短鏈抗體
別 名;ACAD3; Acyl Coenzyme A dehydrogenase, C2 to C3
short chain; Acyl-CoA dehydrogenase, C2 to C3 short chain; Acyl-CoA dehydrogenase,
short chain; Acyl-Coenzyme A dehydrogenase, short chain; AI196007; Bcd-1; Bcd1;
Butyryl CoA dehydrogenase; EC 1.3.99.2; SCAD; Short chain acyl CoA
dehydrogenase; Short-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, mitochondrial;
Unsaturated acyl CoA reductase; ACADS_HUMAN.
研究領(lǐng)域; 細(xì)胞生物 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 線粒體
抗體來源;Rabbit
克隆類型;Polyclonal
交叉反應(yīng);(predicted: Human, Mouse, Rat,
Pig, Cow, )
產(chǎn)品應(yīng)用;WB=1:500-2000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理論分子量;45kDa
細(xì)胞定位;細(xì)胞漿 線粒體
性 狀;Liquid
濃 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human ACADS: 121-220/412
亞 型;IgG
純化方法;affinity purified by Protein A
保存條件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng);This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗體注意事項(xiàng):
確定抗體的名字和特性:?注意抗體的中英文名字、?它名、?亞型等信息,?這些信息對于選擇正確的抗體至關(guān)重要。?
明確實(shí)驗(yàn)類型:?了解你的實(shí)驗(yàn)類型(?如ELISA、?WB、?IHC、?ICC或FACS)?,?因?yàn)榭贵w的說明書通常會列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過的實(shí)驗(yàn)類型。?如果說明書沒有提及某種應(yīng)用類型,?并不意味著該抗體不適用于該實(shí)驗(yàn),?只是表示尚未經(jīng)過該實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。?
選擇適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)樣本種屬:?確定你的實(shí)驗(yàn)樣本是來自人類、?小鼠還是大鼠等,?因?yàn)榭贵w的說明書會列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過的物種。?
考慮樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì):?了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇的抗體,?特別是當(dāng)樣本蛋白在提取和處理過程中可能會變性時(shí),?這會影響抗體的親和反應(yīng)。?
單多克隆抗體的選擇:?單克隆抗體特異性強(qiáng)但親和力相對小,?而多克隆抗體特異性稍弱但親和力強(qiáng)。?根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的抗體。?
注意抗體的特異性:?原的類型對抗體對靶蛋白的特異性有顯著影響。?應(yīng)選擇針對已充分表征的原產(chǎn)生的抗體,?避免使用不合適或質(zhì)量差的原產(chǎn)生的抗體。?
封閉液的選擇:?封閉液的選擇應(yīng)根據(jù)抗體說明書進(jìn)行,?常用的封閉液包括脫脂奶粉和BSA。?封閉液的目的是封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn),?降低背景噪音3。?
抗體孵育注意事項(xiàng):?使用干凈的孵育盒子,?避免油脂等雜物沾到膜上造成非特異信號。?如果一次性需要檢測多個(gè)蛋白,?可以考慮將膜剪開或采用其他技術(shù)如抗體洗脫液處理后再次使用膜
公司正在銷售的產(chǎn)品:
DesELISAKit |
通用型豬副豬嗜血桿菌(HPS)基因檢測試劑盒 |
大鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)elisa分析檢測試劑盒 |
細(xì)胞琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒 |
HPCⅢ ELISA Kit |
HMX3蛋白抗體 |
人鈣網(wǎng)蛋白(CRT)elisa分析檢測試劑盒 |
PELP1 |
食物氨一步法定量檢測試劑盒 |
大鼠中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP3)elisa檢測試劑盒 |
HumanCRTELISAKit |
源盒蛋白B8抗體 |
人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)elisa分析檢測試劑盒 |
HOXB8 |
豬補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa分析檢測試劑盒 |
調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴胺受體相互作用蛋白4抗體 Anti-PDC6I/Alix |
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)elisa檢測試劑盒 |
蛋白酪氨酸激酶9抗體 Anti-PTK9/TWF1 |
單純皰疹病毒糖蛋白D抗體 |
調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 Anti-TLK1 |
HSV1 + HSV2 gD |
絲氨酸蛋白酶抑制劑B12抗體 Anti-SERPINB12 |
乳腺癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體 |
羅丹明標(biāo)記的羊抗牛IgG H&L |
BCAS4 |
Goat Anti-Bovine IgG H&L / RBITC |
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)試劑盒 |
兔抗FITC抗體 |
?;o酶A脫氫酶短鏈抗體FLJ39654; HNF-4-alpha; FRTS4; Hepatic nuclear factor 4 alpha; Hepatocyte nuclear factor 4 alpha; Hepatocyte nuclear factor 4; Hepatocyte nuclear factor 4-alpha; HNF 4 alpha; HNF 4; HNF-4-alpha; HNF4; HNF4A; HNF4A_HUMAN; HNF4a7; HNF4a8; HNF4a9; Hnf4alpha; HNF4alpha10/11/12; MODY 1; MODY; MODY1; NR2A1; NR2A21; Nuclear receptor subfamily 2 group A member 1; OTTHUMP00000031060; OTTHUMP00000031062; TCF 14; TCF; TCF-14; TCF14; Tcf4; Transcription factor 14, hepatic nuclear factor; Transcription factor 14; Transcription factor HNF 4; Transcription factor HNF-4; Transcription factor HNF4. |