原代細胞實驗步驟：

以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細胞分離的方法各實驗室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質酶等）。
5．若進行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉倒置后在37℃培養(yǎng)箱內放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內繼續(xù)進行培養(yǎng)。

組織來源	乳腺組織	貨號	P-X2277
產(chǎn)品規(guī)格	5×105	生長特性	貼壁
產(chǎn)品類別	豬原代細胞	細胞形態(tài)	上皮樣 多角形細胞

細胞詳述：

乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間。淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。腺體由 15-20個腺葉組成，每一腺葉分成若干個腺小葉，每一腺小葉又由10-100個腺泡組成，這些腺泡緊密地排列在小乳管周圍，腺泡的開口與小乳管相連。

乳腺上皮細胞來源于乳腺小葉中。它們與腺體導管和脂肪組織一起在乳腺中形成復雜的網(wǎng)絡結構。乳腺上皮細胞在人和動物體出生、發(fā)育和妊娠中均會受***調控而進行一系列的增長、遷移和分化。水平失調、細胞外基質的變化和其它的基因因素都會導致乳腺上皮細胞惡性增長，終導致乳腺癌的發(fā)生。了解乳腺上皮細胞的特性可以幫助我們理解乳腺癌的病例機制以及為確定新的靶點。

細胞特性：

1）細胞來源于實驗動物正常乳腺組織。

2)細胞鑒定：細胞角蛋白-8（CK-8）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。

我們推薦使用 Delf原代上皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

相關產(chǎn)品：

小鼠大隱靜脈內皮細胞 Mouse primary great saphenous vein endothelial cells	人間皮瘤細胞；NCI-H2452 [H2452]
人主動脈瓣膜間質細胞 Human primary aortic valve interstitial cells	人結直腸腺癌細胞；HT-29
Dami (人巨核細胞白血病細胞) (HEL污染細胞系，暫不供應)	人張氏肝細胞
小鼠卵巢上皮細胞	人臍靜脈內皮細胞（人膀胱癌細胞污染）
SW839（人腎癌細胞）	小鼠肺成纖維細胞 Mouse primary lung fibroblasts
小鼠雜交瘤細胞；c7b8a5	昆蟲卵巢細胞；Sf21

RAB3GAP1	PE-Cy3標記的羊抗兔IgG H&L
JAKMIP3	C2orf15抗體
神經(jīng)長卷曲螺旋蛋白2抗體	MUC20
小鼠白介素1α(IL1α)elisa檢測試劑盒	粘蛋白20抗體
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1抗體	濾泡型轉運蛋白1/II型慢性性白血病抗體
線粒體復合物III蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒	Goat Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy3
大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)elisa檢測試劑盒	泛素化組蛋白H2AX抗體  Anti-Histone H2A.X (Ubiquityl Lys119)
碳酸酐酶11抗體	磷酸化神經(jīng)生長相關蛋白SCG10抗體  Anti-phospho-STMN2/SCG10 (Ser50)
通用型魚氣單細胞菌屬（Aeromonas salmonicida）	血小板白細胞C激酶底物源結構域M2抗體  Anti-PLEKHM2/SKIP
CA XI	泛酸激酶3抗體  Anti-PANK3
IQCK蛋白抗體	犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)elisa檢測試劑盒免費代測	人肝癌細胞；HCC-LY10
大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa檢測試劑盒免費代測	IQCK
HumanFE65檢測試劑盒	MHB檢測試劑盒
人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)elisa分析檢測試劑盒	細胞IP3R受體蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
倉鼠白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒	豬乳腺上皮細胞IL-6 ELISA Kit

注意事項：

1.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。