原代細胞實驗步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個組織塊小于1mm3。在操作時應盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細胞分離的方法各實驗室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質酶等）。
5．若進行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉倒置后在37℃培養(yǎng)箱內放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內繼續(xù)進行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學研究實驗使用、不得用于其它。
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組織來源 |
心臟組織 |
貨號 |
P-X1528 |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長特性 |
貼壁 |
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產(chǎn)品類別 |
大鼠原代細胞 |
細胞形態(tài) |
柱狀細胞 不規(guī)則細胞 |
細胞詳述：
心臟壁主要由心肌構成，心房壁比心室壁薄。心肌的工作細胞包括心房肌和心室肌。心肌細胞為短柱狀，一般只有一個細胞核，心肌細胞之間有閏盤結構。心房與心室的心肌層不直接相連，它們分別起止于心房和心室交界處的纖維支架，形成各自獨立的肌性壁，從而保證心房和心室各自進行獨立的收縮舒張，以推動血液在心臟內的定向流動。
臨床研究表明，在房顫患者心房肌細胞內，發(fā)現(xiàn)存在有異常增高的細胞內鈣蓄積，并證實心肌細胞內鈣超載在心律失常的發(fā)生中起著關鍵作用。此外，在房顫患者心房細胞內也發(fā)現(xiàn)有CaMK Ⅱ的異常高表達。
細胞特性：
1） 組織來源于實驗動物的正常心臟組織。 本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗，不要進行擴增培養(yǎng)。
2) 細胞鑒定：肌球蛋白重鏈(Myosin heavy chain)熒光染色為陽性。
3) 細胞純度：經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式：柱狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 delf原代心肌細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的體外培養(yǎng)試劑。
相關產(chǎn)品：
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小鼠腸間質細胞 Mouse primary intestinal stromal cells |
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HCC38 (人乳腺導管癌細胞) |
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人卵巢上皮細胞 |
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小鼠腸粘膜上皮細胞 |
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Rabbit Anti-Avidin / RBITC |
大鼠17羥孕酮(17-OHP)elisa分析檢測試劑盒 |
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phospho-GIT1 (Tyr545) |
人臂板蛋白3F(S3F)elisa生化檢測試劑盒 |
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磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 |
20βOH-PROG)ELISA kit |
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G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體 Anti-P2Y10 |
魚17α,20β羥基孕酮(17α,20βOH-PROG)elisa生化檢測試劑盒 |
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羅丹明標記的兔抗親和素 |
人輔酶Q10(CoQ10)elisa分析檢測試劑盒 |
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轉錄調控激活蛋白SNF5抗體 Anti-SNF5 |
17-OHP ELISA Kit |
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含patatin樣磷脂酶6抗體 Anti-PNPLA6/NTE |
zeta相關蛋白70抗體 Anti-ZAP70 |
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熱休克轉錄因子HSFY1抗體 |
生長抑素抗體 Anti-Somatostatin |
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Toll樣受體6抗體 Anti-TLR6/CD286 |
軸突導向受體抗體 Anti-Robo |
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HSFY1 |
NUP54抗體 Anti-NUP54 |
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磷酸化異染色質蛋白1抗體（果蠅） |
氨基卞三磺酸（ANTS）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE） |
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中性木聚糖酶測定試劑盒 |
人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株；ACSuR |
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DPF2 |
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雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 |
小鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)elisa檢測試劑盒 |
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膜型卷曲相關蛋白MFRP抗體 |
大鼠心房心肌細胞MFRP |
注意事項：
1.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。