原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。
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產(chǎn)品貨號(hào) |
P-X1458 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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組織來(lái)源 |
外周血 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
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細(xì)胞形態(tài) |
上皮樣 |
產(chǎn)品類(lèi)別 |
人原代細(xì)胞 |
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傳代特性 |
見(jiàn)說(shuō)明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述：
CIK細(xì)胞，即細(xì)胞因子誘導(dǎo)的傷細(xì)胞，由于該細(xì)胞同時(shí)表達(dá)CD3+和CD56+兩種跨膜蛋白，又稱(chēng)為NK細(xì)胞樣T細(xì)胞，具有T細(xì)胞的抗瘤活性和NK細(xì)胞的非MHC限制性瘤特點(diǎn)。
CIK細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別能力強(qiáng)，能**點(diǎn)射腫瘤細(xì)胞，且不會(huì)傷及正常細(xì)胞。尤其對(duì)手術(shù)后或放化療后患者效果顯著，能消除殘留微小的轉(zhuǎn)移病灶，防止癌細(xì)胞擴(kuò)散，提高機(jī)體力。CIK細(xì)胞被認(rèn)為是新一代的腫瘤過(guò)繼細(xì)胞的方案之一。
細(xì)胞特性：
1） 細(xì)胞來(lái)源于外周血。
2） 細(xì)胞鑒定：CD3或者CD56熒光染色為陽(yáng)性。
3） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：我們推薦使用 原代 CIK 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
相關(guān)產(chǎn)品：
兔主動(dòng)脈弓內(nèi)皮細(xì)胞 Rabbit aortic arch endothelial cells
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-C2
小鼠腸巨噬細(xì)胞 Primary mouse intestinal macrophages
小鼠肉瘤細(xì)胞；CCRF S-180
HuTu-80 (人十二脂腸腺癌) (STR鑒定正確)
人牙齦成纖維細(xì)胞
小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞
人鼻咽癌細(xì)胞(高分化)
SUM159PT (人乳腺癌細(xì)胞系) (STR鑒定正確)
兔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 Rabbit aortic adventitia fibroblasts
小鼠雜交瘤細(xì)胞；2A3
大鼠肝細(xì)胞瘤；H4-II-E-C3
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細(xì)胞來(lái)源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來(lái)自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過(guò)任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過(guò)初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過(guò)多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過(guò)傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過(guò)程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過(guò)程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞，以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過(guò)程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來(lái)，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性，包括基因表達(dá)、酶活性、信號(hào)傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞由于長(zhǎng)期在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，可能會(huì)發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長(zhǎng)速率的增加等。因此，傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證，以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長(zhǎng)、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測(cè)試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測(cè)試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究，包括基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng)：需要嚴(yán)格控制無(wú)菌條件，避免細(xì)胞污染；注意細(xì)胞的存活率和純度，避免其他類(lèi)型細(xì)胞的混雜；以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因?yàn)檫^(guò)多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鞘磷脂合成酶1抗體
COL1 ELISA Kit
人A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)elisa生化檢測(cè)試劑盒
大鼠緊密連接蛋白(Ocln)elisa檢測(cè)試劑盒
Sphingomyelin Synthase 1
人晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）elisa檢測(cè)試劑盒
磷酸化增殖細(xì)胞核抗原抗體 Anti-phosphos-PCNA
(Tyr211)
細(xì)胞HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒
Mouse Anti-Human IgG H&L / Cy7
GSHELISAKit
Cy7標(biāo)記的小鼠抗人IgG H&L
人谷胱甘肽(GSH)elisa生化檢測(cè)試劑盒
ATP依賴(lài)解旋酶SMARCA2抗體 Anti-SMARCA2/BRM
ASPAgELISAkit
Cadherin 10
大鼠I型膠原(COL1)elisa生化檢測(cè)試劑盒
乙?；?span>P53(Lys382)抗體 Anti-Acetyl-p53(K382)
CC16ELISAKit
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1抗體（TGFβ1） Anti-TGF Beta 1
小鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)elisa生化檢測(cè)試劑盒
小鼠羧肽酶N1(CPN1)elisa檢測(cè)試劑盒
人白介素1β(IL-1β)elisa生化檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa生化檢測(cè)試劑盒
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞；W6/32
HumanInterleukin1βELISAKit
人Toll樣受體6(TLR6)elisa檢測(cè)試劑盒
大腸桿菌宿主殘留蛋白(E.coli P)elisa生化檢測(cè)試劑盒
植物鈣調(diào)蛋白（CaM）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
鈣粘附分子10抗體
E.coli P ELISA kit
轉(zhuǎn)錄因子OTX1抗體
人CIK細(xì)胞OTX1
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?：
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：
二、?無(wú)菌操作?：整個(gè)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?：跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài)，適時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?：對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的細(xì)胞，可以進(jìn)行冷凍保存，并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營(yíng)養(yǎng)充足。