原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。
5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
|
組織來源 |
肌肉組織 |
貨號(hào) |
P-X2303 |
|
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長特性 |
貼壁 |
|
產(chǎn)品類別 |
牛原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭狀細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述：
產(chǎn)品規(guī)格： >5 × 10 5 細(xì)胞數(shù)
包裝規(guī)格： T-25 培養(yǎng)瓶
細(xì)胞 詳述 ：
骨骼肌細(xì)胞（ Skeletal muscle cells ）是人和動(dòng)物體內(nèi)大的細(xì)胞之一，它們是由成肌細(xì)胞 (Myoblasts) 融合而來的多核細(xì)胞，故骨骼肌的形成是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，并需要多種細(xì)胞信號(hào)通路的參與，包括 phosphatidylinositol 3-kinase ， calcineurin ， STAT3 和 MAPK 等。原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)是研究細(xì)胞分化過程的有效的模型。
細(xì)胞特性：
1）1） 1mL 凍存細(xì)胞懸液裝于 1.8ml 的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在 -80 ℃的條件下保存 1 個(gè)月。
2) T-25 培養(yǎng)瓶充滿完全
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 原代 骨骼肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)原代骨骼肌細(xì)胞的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品 使用：
1) 本產(chǎn)品僅能用于科研
2) 本產(chǎn)品 未通過直接用于活體動(dòng)物和人的審核
3) 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核
相關(guān)產(chǎn)品：
|
兔中耳上皮細(xì)胞 Rabbit primary middle ear epithelial cells |
小鼠抗人IgE雜交瘤細(xì)胞；mAbhIgE-499 |
|
小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Primary mouse intestinal microvascular endothelial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；16DC9-A |
|
KATO III [KATO 3] (人胃癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人雪旺細(xì)胞 |
|
人睪丸支持細(xì)胞 |
食管癌細(xì)胞 |
|
STO (小鼠胚成纖維細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Rabbit aortic endothelial cells |
|
小鼠雜交瘤細(xì)胞；1H6 |
Walker氏癌肉瘤256瘤株；W256 |
|
Phospho-NEDD4-2 (Ser342) |
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
|
BACE1ELISAkit |
甘油含量測(cè)試盒測(cè)定組織樣本 100T 微量酶標(biāo)法 |
|
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1（BACE1）elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
動(dòng)物細(xì)胞/組織線粒體超氧化物歧化酶（Mn/Fe SOD）分離試劑盒 |
|
血管非炎癥分子1抗體 Anti-VNN1 |
咖啡乙酰舒泛（acesulfame K）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒 |
|
磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 |
小鼠百白破抗體elisa檢測(cè)試劑盒 |
|
Rabbit Anti-Human IgG H&L / Cy5.5 |
MMP-9ELISAKit |
|
Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG H&L |
豬促甲狀腺素釋放(TRH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
|
腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制基因) Anti-TP53I13 |
U-TSH ELISA Kit |
|
孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 Anti-Nociceptin receptor |
大鼠高靈敏度促甲狀腺(U-TSH)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
|
維甲酸受體γ抗體 Anti-RAR gamma/Retinoic Acid Receptor gamma |
PorcineTRHELISAKIT |
|
醋酸鉛瓊脂平板 |
HumanDDOSTELISAKit |
|
大鼠前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)elisa檢測(cè)試劑盒 |
雜交瘤（B類）；Z1510C6D10F4G6 |
|
豬鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2γ(CAMK2G/CAMKG)elisa檢測(cè)試劑盒 |
C20orf11 |
|
IFN-β ELISA Kit |
MPP4蛋白抗體 |
|
猴β干擾素(IFN-β)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
人多萜長醇二磷酸寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移酶(DDOST/OST-48)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
|
MPP4 |
牛骨骼肌細(xì)胞20號(hào)染色體開放閱讀框11抗體 |
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何問題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。