本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
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組織來源 |
小鼠的正常肺組織 |
貨號 |
P-X1770 |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長特性 |
貼壁 |
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產(chǎn)品類別 |
小鼠原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
圓形 不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述：
肺巨噬細(xì)胞由單核細(xì)胞分化而來，廣泛分布在肺間質(zhì)內(nèi)，在細(xì)支氣管以下的管道周圍和肺泡隔內(nèi)較多。肺巨噬細(xì)胞的吞噬、和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。
吸入空氣中的塵粒、等異物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見塵粒、等物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見塵粒、次級溶酶體及吞噬體等。
肺巨噬細(xì)胞還可吞噬衰老的紅細(xì)胞，在心力衰竭患者出現(xiàn)肺瘀血時(shí)，大量紅細(xì)胞從溢出，被巨噬細(xì)胞吞噬。吞噬異物的巨噬細(xì)胞，有的從肺泡腔經(jīng)呼吸道粘液流動和纖毛運(yùn)動而被咳出，有的進(jìn)入肺管隨進(jìn)入肺結(jié)內(nèi)。
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物小鼠的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD68或MAC387熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：圓形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 原代 巨噬 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。
5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。
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