原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
以胚胎小鼠為例
1．取材：將孕鼠拉頸椎處死，投入75%酒精浸泡數(shù)秒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蠟盤(pán)中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織，打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2．用Hanks液洗滌3次，剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3．用彎頭剪把胚胎盡量剪碎，每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次，自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行，即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4．若使用消化法，則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶，37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液，800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清，加入帶有雙抗的培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注：細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同，所采用的消化酶也不相同（如膠原酶，透明質(zhì)酶等）。
5．若進(jìn)行組織塊培養(yǎng)，則不做步驟4，加入幾滴血清于組織塊中，再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi)，注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2－3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基，使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基，放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
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組織來(lái)源 |
腸道組織 |
貨號(hào) |
P-X1585 |
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產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
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產(chǎn)品類別 |
大鼠原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述：
腸指的是從胃幽門(mén)至的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。
腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層，由外向內(nèi)依次為：漿膜層，平滑肌層，粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層：靠近粘膜下層的是一層平滑肌，稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織，又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細(xì)胞構(gòu)成的粘膜。小腸粘膜有縱行和橫行皺襞，并有無(wú)數(shù)細(xì)小的指狀突起，稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內(nèi)陷成管狀，稱為利貝屈恩氏隱窩。
隱窩基底部的上皮細(xì)胞不斷地進(jìn)行有絲分裂，產(chǎn)生新細(xì)胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細(xì)胞，它分泌粘液，起滑潤(rùn)食物和保護(hù)粘膜的作用。大腸內(nèi)無(wú)絨毛，其大部分上皮細(xì)胞分泌粘液。直腸的上皮細(xì)胞也分泌粘液。
細(xì)胞特性：
1）來(lái)源：腸道組織
2）含量：>5x105 個(gè)/mL
3）鑒定：角蛋白(PCK)熒光染色法
4）純度：>85%
5）污染：支原體、、酵母和檢測(cè)為陰性
6）規(guī)格：1mL凍存管包裝
相關(guān)產(chǎn)品：
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兔牙齦成纖維細(xì)胞 Rabbit gingival fibroblasts |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；CANX |
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小鼠腹腔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 Mouse primary abdominal aortic endothelial cells |
小鼠成纖維細(xì)胞包裝細(xì)胞；pA317(pLCDSN) |
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NCI-H2170 (人肺鱗癌細(xì)胞) |
人胃粘膜上皮細(xì)胞 |
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人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞 |
人慢性B細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
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SK-N-MC (人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞) |
兔眼外肌成纖維細(xì)胞 Rabbit primary extraocular muscle fibroblasts |
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小鼠雜交瘤細(xì)胞(抗人β-HCG)；CBB1 |
小鼠肉瘤細(xì)胞；CCRF S-180 |
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Gliadin |
人丙烯醛(ACR)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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IL-3 ELISA Kit |
山羊白介素10(IL-10)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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雞白介素3(IL-3)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
組織三磷酸肌醇（IP3）含量化學(xué)熒光定量檢測(cè)試劑盒 |
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磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 Anti-phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355) |
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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麥角蛋白抗體 |
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)elisa檢測(cè)試劑盒 |
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Goat Anti-Chicken IgG H&L whole serum |
ACRELISAkit |
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羊抗雞IgG H&L抗血清 |
小鼠白蛋白elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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5-羥色胺受體2C抗體 Anti-5HTR2C |
E2ELISA kit |
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多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4 Anti-PARP4 |
魚(yú)雌二醇(E2)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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腺苷酸硫酸激酶1抗體 Anti-PAPSS1 |
MousealbuminELISAKit |
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嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體 Anti-NCF1/p47 phox |
COPS6 |
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mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 Anti-Raptor |
抗精核蛋白；HP3 |
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溴化丙胺太林相關(guān)蛋白2抗體 Anti-STOML2/SLP2 |
LPPR3 |
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LARP2 |
SGEF蛋白抗體 |
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LARP2蛋白抗體 |
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體 |
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SGEF |
大鼠腸粘膜上皮細(xì)胞脂質(zhì)磷酸磷酸酶相關(guān)蛋白3抗體 |
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，有任何問(wèn)題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。