原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟?：
1.?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理，使其分散成單個細胞。
?2.細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。
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產(chǎn)品貨號 |
P-X2313 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
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組織來源 |
皮膚組織 |
生長特性 |
貼壁 |
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細胞形態(tài) |
鋪路石狀細胞 不規(guī)則細胞 |
產(chǎn)品類別 |
狗原代細胞 |
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傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細胞詳述：
微血管內(nèi)皮細胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管等多種和綜合癥發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細胞受損，必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細胞正常的生物學功能，引起多種的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì)，來維持血管的正常狀態(tài)。
細胞特性：
1） 組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2) 細胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品：
兔胸腺上皮細胞 Rabbit thymic epithelial cells
艾氏腹水癌細胞；EAC
小鼠肝卵圓細胞 Primary mouse hepatic oval cells
抗T細胞單克隆抗體雜交瘤細胞；CD3
NCI-H358 (人非小細胞肺癌細胞) (STR鑒定正確)
人胃癌阿霉素耐藥株
人膀胱移行上皮細胞
T739小鼠肺腺癌瘤株
SK-Hep-1 (人肝癌細胞) (STR鑒定正確)
兔雪旺細胞 Rabbit Schwann cell
小鼠源細胞
小鼠雜交瘤細胞；F6E4F8b2
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別：
1. 細胞來源
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細胞進行的培養(yǎng)。這些細胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細胞，在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細胞。這些細胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件，并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細胞，以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細胞系。
傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細胞從培養(yǎng)容器中分離出來，然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細胞特性
原代培養(yǎng)：原代細胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學特性，包括基因表達、酶活性、信號傳導等。這些特性使得原代細胞成為研究生理和病理條件下細胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞由于長期在體外環(huán)境中生長，可能會發(fā)生一些生物學特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此，傳代細胞可能需要進行鑒定和驗證，以確保其仍具有所需的生物學特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng)：所獲得的細胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大，更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng)：由于細胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快，傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細胞以滿足實驗需求，如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng)：原代細胞通常用于篩選、毒理學測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性，因此被認為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng)：傳代細胞被廣泛用于各種生物學研究，包括基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導、細胞周期調(diào)控等。傳代細胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細胞生物學機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng)：需要嚴格控制無菌條件，避免細胞污染；注意細胞的存活率和純度，避免其他類型細胞的混雜；以及考慮細胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng)：需要關(guān)注細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化，定期檢查細胞是否存在污染或變異；注意傳代次數(shù)，因為過多的傳代可能導致細胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
GCP4
人垂草扁桃酸(VMA)elisa生化檢測試劑盒
Horse Testosterone(T)ELISA Kit
大鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)elisa生化檢測試劑盒
馬睪酮(T)elisa生化檢測試劑盒
小鼠趨化因子配體1(CCL1)elisa生化檢測試劑盒
泛素D抗體 Anti-Ubiquitin D
細胞CASEIN KINASE 1δ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
γ-微管蛋白GCP4抗體
人EB病毒核抗原3A抗體(IgM)elisa檢測試劑盒
Rabbit Anti-Monkey IgG H&L
HumanVMAELISAKit
兔抗猴IgG H&L
小鼠丙二醛(MDA)elisa生化檢測試劑盒
IQCJ抗體 Anti-SCHIP1/IQCJ
IGF2 ELISA kit
RNA聚合酶II抗體 Anti-Pol II/RNA polymerase II
魚胰島素樣生長因子II(IGF2)elisa生化檢測試劑盒
PSF2蛋白抗體 Anti-PSF2
MDAELISAKit
TEM電鏡石蠟切片組織化學AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測試劑盒（含AP二抗）
CHMP2A
大鼠KiSS-1受體(KISS1R)elisa檢測試劑盒
抗人絨毛膜促性腺雜交瘤細胞；HN4
小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)elisa生化檢測試劑盒
KRT86
KIAA2018
角化蛋白S100A18抗體
KIAA2018蛋白抗體
乳腺腺癌標志物CHMP2A抗體
S100A18
狗皮下微血管內(nèi)皮細胞細胞角蛋白86抗體
?原代細胞培養(yǎng)的注意事項?：
一、在進行原代細胞培養(yǎng)時，需要注意以下幾點：
二、?無菌操作?：整個過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。
?三、細胞融合和傳代?：跟蹤細胞的融合狀態(tài)，適時進行傳代，避免細胞分化。
?四、冷凍保存和復蘇?：對于需要長期保存的細胞，可以進行冷凍保存，并注意復蘇時的操作細節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?：根據(jù)細胞類型選擇合適的培養(yǎng)基，并定期更換以保證營養(yǎng)充足。