原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動物組織從機(jī)體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計(jì)數(shù)?:使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng),以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號 |
P-X2305 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來源 |
手術(shù)切除的正常骨骼肌組織 |
生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
多角形細(xì)胞 |
產(chǎn)品類別 |
牛原代細(xì)胞 |
傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述:
骨骼肌是動物體內(nèi)含量多的組織,肌肉組織供血豐富。微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管等多種和綜合癥發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能,引起多種的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì),來維持血管的正常狀態(tài)。
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于手術(shù)切除的正常骨骼肌組織。
2)細(xì)胞鑒定:vWF熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rabbit astrocyte cells
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;FIB 1-11
小鼠肝星狀細(xì)胞 Mouse hepatic stellate cells;mHSC
雜交瘤細(xì)胞;1-PreS1(1-E6)
NCI-H596 (人肺腺鱗癌細(xì)胞)
人外周血B細(xì)胞
人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞
人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞
SiHa (人頸鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
兔胸腺上皮細(xì)胞 Rabbit thymic epithelial cells
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2
抗人IgA雜交瘤細(xì)胞;6E9
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實(shí)驗(yàn)室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件,并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來,然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時(shí)進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性,包括基因表達(dá)、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長,可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此,傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗(yàn)證,以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實(shí)驗(yàn)需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究,包括基因表達(dá)調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制的理想模型。
6. 注意事項(xiàng)
原代培養(yǎng):需要嚴(yán)格控制無菌條件,避免細(xì)胞污染;注意細(xì)胞的存活率和純度,避免其他類型細(xì)胞的混雜;以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因?yàn)檫^多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
GBA3
人催乳素抑制(PIH)elisa生化檢測試劑盒
BDNF ELISA kit
同位素[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴(kuò)增試劑盒
貓腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)elisa生化檢測試劑盒
豚鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa檢測試劑盒
泛素硫酯酶L1+3抗體 Anti-UCHL1+3
動物組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒
β葡萄糖苷酶3抗體
大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)elisa檢測試劑盒
Goat Anti-Guinea Pig IgG H&L / Gold
HumanPIHELISAKit
膠體金標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG H&L
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)elisa生化檢測試劑盒
S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 Anti-S100A11
VK1 ELISA Kit
前列環(huán)素受體抗體 Anti-Prostaglandin I2 Receptor
植物維生素K1(VK1)elisa生化檢測試劑盒
對氧磷酶3抗體 Anti-PON3
PF/PFPELISAKit
輔酶Q10含量試劑盒
CEP89
細(xì)胞HSV2(HERPES SIMPLX2)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
抗丙型肝炎病毒NS3抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株;HCVNS3-57
人蛋白激酶C(PKC)elisa生化檢測試劑盒
KRBA2
KDELC2
RPS27A抗體
KDELC2蛋白抗體
中心體蛋白89抗體
RPS27A
牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞KRBA2蛋白抗體
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項(xiàng)?:
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要注意以下幾點(diǎn):
二、?無菌操作?:整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?:跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài),適時(shí)進(jìn)行傳代,避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?:對于需要長期保存的細(xì)胞,可以進(jìn)行冷凍保存,并注意復(fù)蘇時(shí)的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營養(yǎng)充足。