原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
產(chǎn)品貨號(hào) |
P-X1277 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來源 |
動(dòng)脈組織 |
生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
產(chǎn)品類別 |
人原代細(xì)胞 |
傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述:
動(dòng)脈是由內(nèi)膜、中層彈力層和外膜構(gòu)成,三層緊密貼合在一起。其中,外膜是專門的支持組織,外膜成纖維是外膜的主要成分,在血管炎癥反應(yīng)、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于人的正常動(dòng)脈組織。
2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔心室心肌細(xì)胞 Primary rabbit ventricular myocytes |
小鼠B細(xì)胞系;RMS-S-A 3101 |
小鼠膈肌細(xì)胞 Mouse primary diaphragm cells |
雜交瘤細(xì)胞;ETMcAb4F11 |
NCI-H838 (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
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中國地鼠卵巢細(xì)胞-木糖基轉(zhuǎn)移酶I缺陷型;pgsA-745 |
GALNT2 |
人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
FGF23 ELISA Kit |
聚甲基半乳糖醛酸酶(Polymethylgalacturonase;PMG)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
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泛素激活酶2H抗體 Anti-Ube2H/UBCH2 |
小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa檢測(cè)試劑盒 |
GALNT2蛋白抗體 |
大黃素甲醚含量試劑盒 |
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CCK-8ELISAKit |
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小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
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Sea Lion Triiodothyronine(T3)ELISA kit |
早老素γ分泌酶2抗體 Anti-PEN2 |
三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
磷脂酰肌醇激酶(PI3Kβ)抗體 Anti-PI3 Kinase p110 beta |
CCKELISAKit |
小鼠癌胚抗原(CEA)elisa檢測(cè)試劑盒 |
CDC37L1 |
石蠟切片組織JNK/SAPK蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
抗丙型肝炎病毒NS5抗原單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株;NS5 |
大鼠脂聯(lián)素(ADP)elisa檢測(cè)試劑盒 |
KIF25 |
KCNIP4 |
環(huán)指蛋白160抗體 |
A型鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白4抗體 |
細(xì)胞分裂周期37樣蛋白1抗體 |
RNF160 |
人動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員25抗體 |
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何問題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。