原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個細(xì)胞。
?2.細(xì)胞計數(shù)?:使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),確保細(xì)胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng),以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號 |
P-X1488 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來源 |
人的眼球下囊組織 |
生長特性 |
貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
產(chǎn)品類別 |
人原代細(xì)胞 |
傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細(xì)胞詳述:
人眼結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞來自于眼結(jié)膜下囊組織,結(jié)膜囊由瞼結(jié)膜、球結(jié)膜和穹窿結(jié)膜所形成的潛在性囊狀腔隙,囊開口于瞼裂,眼瞼閉合即囊口的閉合。
細(xì)胞特性:
1) 組織來源于人的眼球下囊組織。
2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔心房心肌細(xì)胞 Primary rabbit atrial cardiomyocytes
小鼠雜交瘤細(xì)胞;WSSV-A
小鼠股動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Mouse primary femoral artery endothelial
cells
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;AFB1B5
PC-3M IE8 (人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)
人胎盤絨膜癌細(xì)胞
人腎成纖維細(xì)胞
人卵巢腺癌細(xì)胞(2014年9月新引進(jìn))(干細(xì)胞庫保藏)
Sf9 (昆蟲卵巢細(xì)胞)
兔心室心肌細(xì)胞 Primary rabbit ventricular myocytes
小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI-13VAR
小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8H4
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細(xì)胞來源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細(xì)胞進(jìn)行的培養(yǎng)。這些細(xì)胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細(xì)胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細(xì)胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細(xì)胞。這些細(xì)胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件,并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細(xì)胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,以進(jìn)行進(jìn)一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細(xì)胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細(xì)胞從培養(yǎng)容器中分離出來,然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進(jìn)行進(jìn)一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細(xì)胞達(dá)到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進(jìn)行。
3. 細(xì)胞特性
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性,包括基因表達(dá)、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細(xì)胞成為研究生理和病理條件下細(xì)胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞由于長期在體外環(huán)境中生長,可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達(dá)的變化、細(xì)胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此,傳代細(xì)胞可能需要進(jìn)行鑒定和驗證,以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細(xì)胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細(xì)胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細(xì)胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細(xì)胞以滿足實驗需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細(xì)胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認(rèn)為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細(xì)胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究,包括基因表達(dá)調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控等。傳代細(xì)胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細(xì)胞生物學(xué)機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng):需要嚴(yán)格控制無菌條件,避免細(xì)胞污染;注意細(xì)胞的存活率和純度,避免其他類型細(xì)胞的混雜;以及考慮細(xì)胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細(xì)胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細(xì)胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因為過多的傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
sPLA2ELISAKit
1號染色體開放閱讀框183抗體
正常大鼠(Sprague Dawley)肝組織微粒體組分(5 毫克/毫升)
血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 Anti-VEGFR2/FLK1
甘氨酸含量測試盒
磷酸化谷氨酸受體1抗體 Anti-Phospho-NMDAR1(Ser897)
互養(yǎng)蛋白2抗體 Anti-Syntrophin-2
c-Myc應(yīng)答蛋白抗體 Anti-RCL/c Myc responsive
人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa生化檢測試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子相互作用蛋白1抗體 Anti-TTI1
3-βD glucosidase ELISA Kit
C1orf183
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)elisa生化檢測試劑盒
糖原含量測試盒
鋅指脂蛋白217抗體 Anti-ZNF217
MGEA5
環(huán)指蛋白11抗體 Anti-RNF11
MGEA5抗體
谷氨酸受體NMDAζ1抗體 Anti-NMDA epsilon 1
大鼠維生素D2(VD2)elisa檢測試劑盒
胞粘蛋白1抗體抗體 Anti-Cytohesin 1/PSCD1
CCDC6
蛋白酶體PSMα2抗體 Anti-Proteasome 20S alpha
2
抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤細(xì)胞株;MP-H5
血栓素A2受體抗體 Anti-TXA2R
ELOVL4
PIGA
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgA
紅細(xì)胞磷脂酰肌醇聚糖A抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
Rabbit Anti-Human IgA / PE-Cy3
人結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞長鏈脂肪酸延長酶ELOVL4抗體
?原代細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項?:
一、在進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)時,需要注意以下幾點:
二、?無菌操作?:整個過程需要在無菌條件下進(jìn)行,以防止污染。
?三、細(xì)胞融合和傳代?:跟蹤細(xì)胞的融合狀態(tài),適時進(jìn)行傳代,避免細(xì)胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?:對于需要長期保存的細(xì)胞,可以進(jìn)行冷凍保存,并注意復(fù)蘇時的操作細(xì)節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營養(yǎng)充足。