原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來(lái)源 |
人臍帶組織 |
貨號(hào) |
P-X1497 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
產(chǎn)品類別 |
人原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
梭形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述:
臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu)。臍帶中通過(guò)尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈。在中,動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的,與胎盤的子體部胎兒靠近,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行 CO 2 和 O 2 ,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒來(lái)的廢物運(yùn)送至胎盤,臍靜脈將 O 2 和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細(xì)胞,它能分化成許多種組織細(xì)胞,并且具有取材方便,無(wú)倫理學(xué)爭(zhēng)議等優(yōu)點(diǎn),因此越來(lái)越受到研究工作者們的關(guān)注。
細(xì)胞特性:
1) 細(xì)胞來(lái)源于人臍帶組織。
2) 細(xì)胞鑒定: CD44熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞 Rabbit intestinal crypt epithelial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;CHGF-002 |
小鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞 Mouse primary femoral head microvascular endothelial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;12B2 |
QG-56 (人肺扁平上皮癌細(xì)胞) |
人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞 |
小鼠心肌細(xì)胞 |
人甲狀腺癌細(xì)胞KMH-2(干細(xì)胞庫(kù)保藏) |
SF763 (人腦瘤細(xì)胞) |
兔心肌干細(xì)胞 Rabbit primary myocardial stem cells |
小鼠腎腺癌細(xì)胞;RAG |
蘭州黑白花奶牛舌尖細(xì)胞;NHBT |
HumanS100A14ELISAKit |
1號(hào)染色體開放閱讀框123抗體 |
酵母鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
等電壓依賴性陰離子通道抗體 Anti-VDAC |
犬B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
硫酸軟骨素蛋白多糖4/黑色素瘤相關(guān)蛋白抗體 Anti-NG2/CSPG4 |
新型分泌細(xì)胞表面蛋白/成骨細(xì)胞相關(guān)蛋白SCUBE3抗體 Anti-SCUBE3 |
環(huán)指蛋白146抗體 Anti-RNF146 |
人鈣結(jié)合蛋白S100A14 elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
T細(xì)胞受體α抗體 Anti-TCR alpha |
3-NT ELISA Kit |
C1orf123 |
大鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
小鼠高密度脂蛋白(HDL)elisa檢測(cè)試劑盒 |
鋅指蛋白423抗體 Anti-ZNF423/OAZ |
MEKK3 |
細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5抗體 Anti-RAC1/MIG5 |
MAPK/ERK激酶3重組兔單克隆抗體 |
中心粒蛋白Nudel抗體 Anti-NUDEL/NDEL1 |
大鼠γ-氨基丁酸受體亞基α1(GABRA1)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
前列腺癌和乳腺癌高表達(dá)蛋白抗體 Anti-PBOV1 |
CCDC158 |
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體 Anti-PDZD9 |
抗青霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株;PenS-4C1 |
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β抗體 Anti-TIF1 beta/KAP1/TRIM28 |
eIF2B4 |
Persephin |
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM |
PSP抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體 |
Rabbit Anti-Guinea Pig IgM / PE-Cy3 |
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞eIF2Bδ蛋白抗體 |
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何問(wèn)題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。