原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個細胞。
?2.細胞計數(shù)?:使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù),確保細胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng),以維持細胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號 |
P-X2170 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來源 |
脊椎組織 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
梭形 不規(guī)則細胞 |
產(chǎn)品類別 |
兔原代細胞 |
傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細胞詳述:
椎體終板軟骨干細胞屬于成體干細胞的一種,具有單克隆形成能力,以及成骨、成脂與成軟骨分化的重要特性。
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的脊椎組織。
2) 細胞鑒定:CD44或CD90熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔小腸黏膜上皮細胞 Rabbit small intestinal mucosal epithelial
cells
雜交瘤細胞;HSP70
小鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細胞 Mouse primary skeletal muscle
microvascular endothelial cells
小鼠雜交瘤細胞株;MCM1
QSG-7701 (人肝細胞) (Hela污染細胞系,暫不供應)
人髓母細胞瘤細胞Daoy(干細胞庫保藏)
人尿道上皮細胞
人腎上腺皮質(zhì)小細胞癌細胞
Sf21 (昆蟲卵巢細胞)
兔心房心肌細胞 Primary rabbit atrial cardiomyocytes
小鼠乳腺癌細胞;4T1
抗補體C3小鼠雜交瘤細胞;2A10
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細胞來源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細胞進行的培養(yǎng)。這些細胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細胞。這些細胞已經(jīng)適應了人工培養(yǎng)條件,并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細胞,以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應體外培養(yǎng)條件的細胞從培養(yǎng)容器中分離出來,然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細胞特性
原代培養(yǎng):原代細胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學特性,包括基因表達、酶活性、信號傳導等。這些特性使得原代細胞成為研究生理和病理條件下細胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細胞由于長期在體外環(huán)境中生長,可能會發(fā)生一些生物學特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此,傳代細胞可能需要進行鑒定和驗證,以確保其仍具有所需的生物學特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細胞已適應體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細胞以滿足實驗需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細胞通常用于篩選、毒理學測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細胞被廣泛用于各種生物學研究,包括基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導、細胞周期調(diào)控等。傳代細胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細胞生物學機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng):需要嚴格控制無菌條件,避免細胞污染;注意細胞的存活率和純度,避免其他類型細胞的混雜;以及考慮細胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因為過多的傳代可能導致細胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HumanCalprotectinELISAkit
1號染色體開放閱讀框111抗體
Hepatitis B virus RFLP基因分析試劑盒
VWCE抗體 Anti-VWCE
雞Toll樣受體4(TLR4)elisa檢測試劑盒
神經(jīng)細胞正五聚體1抗體 Anti-NPTX1/NP1
堿性螺旋-環(huán)-螺旋轉(zhuǎn)錄因子SCXA抗體 Anti-SCXA/Scleraxis
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位2抗體 Anti-RAB3GAP2
人鈣衛(wèi)蛋白elisa生化檢測試劑盒
分子伴侶復合體TCP-1α抗體 Anti-TCP1 alpha
PⅢCP ELISA Kit
C1ORF111
大鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)elisa生化檢測試劑盒
小鼠成纖維細胞生長因子6(FGF6)elisa檢測試劑盒
ZSWIM3蛋白抗體 Anti-ZSWIM3
MEFV
磷酸化ras基因相關(guān)蛋白Rab24抗體 Anti-phospho-Rab24(Ser95)
地中海熱蛋白MEFV抗體
磷酸化酪氨酸激酶B抗體 Anti-phospho-TrkB (Tyr705)
大鼠CD44分子(CD44)elisa檢測試劑盒
磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗體 Anti-phospho-PTK9/TWF1(Tyr321)
CCDC144B
凋亡相關(guān)蛋白6抗體 Anti-PDCD6/ALG2
小鼠白血病細胞;P388
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體 Anti-TIF1 gamma/Trim33
eIF2B epsilon
PELO
羅丹明標記的兔抗狗IgG H&L
PELO蛋白抗體
FLJ36492蛋白抗體
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / RBITC
兔椎體終板軟骨干細胞eIF2B蛋白抗體
?原代細胞培養(yǎng)的注意事項?:
一、在進行原代細胞培養(yǎng)時,需要注意以下幾點:
二、?無菌操作?:整個過程需要在無菌條件下進行,以防止污染。
?三、細胞融合和傳代?:跟蹤細胞的融合狀態(tài),適時進行傳代,避免細胞分化。
?四、冷凍保存和復蘇?:對于需要長期保存的細胞,可以進行冷凍保存,并注意復蘇時的操作細節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細胞類型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營養(yǎng)充足。