原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤(pán)中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi),注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來(lái)源 |
視網(wǎng)膜組織 |
貨號(hào) |
P-X1997 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
產(chǎn)品類(lèi)別 |
小鼠原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
圓形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述:
小膠質(zhì)細(xì)胞分布于整個(gè)系統(tǒng),是神經(jīng)系統(tǒng)小的一種膠質(zhì)細(xì)胞,約占整個(gè)膠質(zhì)細(xì)胞的5-10%。作為常駐神經(jīng)系統(tǒng)的效應(yīng)細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞及其介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥在神經(jīng)系統(tǒng)的損傷及的轉(zhuǎn)歸過(guò)程中起著非常重要的作用。
細(xì)胞特性:
1) 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的視網(wǎng)膜組織。 本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,增殖能力很弱,建議客戶(hù)收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),不要進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng) 。
2) 細(xì)胞鑒定:CD68熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:圓形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔纖維環(huán)細(xì)胞 Rabbit annulus fibrosus cell |
甲基單抗細(xì)胞;Met-1 |
小鼠骨膜干細(xì)胞 Primary mouse periosteal stem cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;VZV-gE-4A2 |
RKO-E6 (人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
大鼠心肌成纖維細(xì)胞 |
人低分化肺腺癌細(xì)胞 |
SF126 (人腦瘤細(xì)胞)(STR鑒定正確) |
兔小腸隱窩上皮細(xì)胞 Rabbit intestinal crypt epithelial cells |
小鼠前列腺癌細(xì)胞;RM-1 |
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病細(xì)胞;L615 |
LXRαELISAKit |
19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體 |
小鼠細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體 Anti-WISP1 |
大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)elisa檢測(cè)試劑盒 |
神經(jīng)元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關(guān)蛋白抗體 Anti-NLGN4X |
溶質(zhì)載體蛋白家族20成員2抗體 Anti-SLC20A2/PIT2 |
軸突導(dǎo)向受體蛋白2抗體 Anti-Robo2 |
人肝X受體α(LXRα)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
內(nèi)膜抗體 Anti-sFRP-4 |
APLN ELISA Kit |
C19orf42 |
大鼠Apelin(APLN)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
人黑色素瘤elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
鋅指蛋白318抗體 Anti-ZNF318 |
MBD3 |
絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 Anti-RPS6KA1/p90RSK/RSK1 |
甲基化CpG結(jié)合蛋白3抗體 |
雄受體復(fù)合物相關(guān)蛋白/核受體相互作用蛋白抗體 Anti-NRIP |
隱孢子蟲(chóng)(Cryptosporidium)涂片金洋抗酸(Kinyoung Acid Fast)染色試劑盒 |
過(guò)氧化還原酶1抗體 Anti-PRDX1 |
Cathepsin S |
配對(duì)盒基因2抗體 Anti-PAX2 |
小鼠髓性白血病細(xì)胞;M-NFS-60 |
TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗體 Anti-TIEG1/KLF10 |
EFTUD2 |
PCDHGA7 |
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L |
原鈣粘蛋白γA7抗體 |
組織蛋白酶S抗體 |
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / PE-Cy7 |
小鼠視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細(xì)胞延伸因子結(jié)合蛋白EFTUD2抗體 |
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶(hù)收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶(hù)需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶(hù)提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶(hù)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何問(wèn)題可聯(lián)系我們?cè)诰€(xiàn)客服。