原代細(xì)胞實(shí)驗步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個組織塊小于1mm3。在操作時應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶內(nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗使用、不得用于其它。
組織來源 |
骨髓血組織 |
貨號 |
P-X2302 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長特性 |
貼壁 |
產(chǎn)品類別 |
羊原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
長梭形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述:
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,對骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)不僅有機(jī)械支持作用,還能分泌多種生長因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潛能,能促進(jìn)間充質(zhì)組織的,如:骨、軟骨、肌肉、韌帶、肌腱、脂肪及基質(zhì)等組織。
在骨髓中,BMSCs占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%~0.1%,含量極低。而同時,由于組織工程需要大量的種子細(xì)胞,從嚙齒類動物骨髓分離BMSCs的技術(shù)上的難度限制了許多實(shí)驗的開展。體外分離培養(yǎng)純度高、活力強(qiáng)、生物特性均一的BMSCs對組織工程及細(xì)胞的體內(nèi)、體外實(shí)驗顯得至關(guān)重要。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗動物的正常骨髓血組織。
2)細(xì)胞鑒定:CD44熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:長梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔胃平滑肌細(xì)胞 Rabbit gastric smooth muscle cells |
梅花干擾素-γ單克隆抗體細(xì)胞;CerIFN-γ4C |
小鼠骨髓肥大細(xì)胞 Mouse primary bone marrow mast cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;2H4 |
RWPE-2 (人前列腺正常細(xì)胞) |
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 |
小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
615小鼠T細(xì)胞性白血病瘤株 |
SCaBER (人膀胱鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔小腸黏膜上皮細(xì)胞 Rabbit small intestinal mucosal epithelial cells |
小鼠胚胎細(xì)胞;SC-1 |
牛腎細(xì)胞;MDBK |
人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 |
Mouse Anti-Bovine IgG H&L / PE |
肽α1抗體 Anti-Thymosin Alpha-1/PTMA |
DDX60L |
HCMV UL49 |
ATP依賴RNA解旋酶DDX60樣蛋白抗體 |
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa檢測試劑盒 |
MAML3 |
Oncomodulin |
主導(dǎo)控制樣蛋白3抗體 |
癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體 |
FBX47蛋白抗體 |
石蠟切片組織HISTONE H3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 |
腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Anti-PEPT2/SLC15A2 |
HumanIL-2sRβ檢測試劑盒 |
PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgG H&L |
小鼠SCAF11蛋白(SFRS2IP/CASP11)elisa檢測試劑盒 |
T細(xì)胞識別的鱗狀細(xì)胞抗原抗體 Anti-SART1 |
轉(zhuǎn)基因棉花GK19品系基因檢測試劑盒 |
鞘脂激活蛋白原抗體 Anti-PSAP |
POMC ELISA kit |
CASPASE-2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 |
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠巨噬細(xì)胞;Ana-1 |
丙酮酸(PA)測試盒 |
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測試劑盒 |
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)elisa檢測試劑盒 |
大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白RhoE elisa分析檢測試劑盒 |
CBS檢測試劑盒 |
6-磷酸葡糖糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒 |
Rat Rho-related GTP Binding Protein RhoE ELISA Kit |
羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞人胱硫醚β-合酶(CBS)elisa分析檢測試劑盒 |
注意事項:
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何問題可聯(lián)系我們在線客服。