原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟?:
1.?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用胰蛋白酶等消化酶處理,使其分散成單個細胞。
?2.細胞計數(shù)?:使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù),確保細胞密度適中。
3.?接種培養(yǎng)?:將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4.?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當(dāng)細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng),以維持細胞的生長狀態(tài)。
產(chǎn)品貨號 |
P-X2287 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
組織來源 |
鼻腔粘膜組織 |
生長特性 |
貼壁 |
細胞形態(tài) |
鋪路石狀細胞 不規(guī)則細胞 |
產(chǎn)品類別 |
豬原代細胞 |
傳代特性 |
見說明 |
用途 |
僅供科研 |
細胞詳述:
鼻腔粘膜是覆蓋在動物體內(nèi)呼吸器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。鼻腔粘膜覆蓋于鼻腔表面,粘膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上,細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細胞,部分子細胞向淺層移動?;讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細胞,再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀,基底層細胞能不斷分裂,以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的,有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常鼻腔粘膜組織。
2) 細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)或細胞角蛋白-19(CK-19)熒光染色為陽性。經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4) 細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔胃黏膜成纖維細胞 Rabbit primary gastric mucosal fibroblasts
雜交瘤細胞;6H7
小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞 Mouse primary bone marrow mesenchymal stem
cells;mbmsc
小鼠雜交瘤細胞株;XYCDY-1BV-1E6
SF17 (人腦瘤細胞)
人食管鱗癌細胞
人心肌細胞
615小鼠滑膜肉瘤瘤株
SBC-2(人小細胞肺癌細胞)
兔纖維環(huán)細胞 Rabbit annulus fibrosus cell
小鼠胚胎內(nèi)層細胞團;R1
兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)
原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別:
1. 細胞來源
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指從生物體組織中直接分離出的細胞進行的培養(yǎng)。這些細胞通常來自活檢樣本或手術(shù)摘除的組織。原代培養(yǎng)的細胞尚未經(jīng)過任何實驗室的人工選擇或適應(yīng)。組織傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)指的是經(jīng)過初次分離培養(yǎng)后的細胞,在體外環(huán)境中經(jīng)過多次分裂和增殖后的細胞。這些細胞已經(jīng)適應(yīng)了人工培養(yǎng)條件,并可以通過傳代方式多次增殖。
2. 培養(yǎng)過程
原代培養(yǎng):原代培養(yǎng)的過程通常包括組織的解離、細胞的分離、種植和培養(yǎng)等步驟。原代細胞培養(yǎng)的目的是獲得足夠數(shù)量的細胞,以進行進一步的實驗研究或建立穩(wěn)定的細胞系。
傳代培養(yǎng):傳代培養(yǎng)的過程涉及到將已經(jīng)適應(yīng)體外培養(yǎng)條件的細胞從培養(yǎng)容器中分離出來,然后重新種植到新的培養(yǎng)容器中進行進一步培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)通常需要在細胞達到一定密度或出現(xiàn)接觸抑制時進行。
3. 細胞特性
原代培養(yǎng):原代細胞通常具有更接近自然狀態(tài)下的生物學(xué)特性,包括基因表達、酶活性、信號傳導(dǎo)等。這些特性使得原代細胞成為研究生理和病理條件下細胞行為的重要工具。
傳代培養(yǎng):傳代細胞由于長期在體外環(huán)境中生長,可能會發(fā)生一些生物學(xué)特性的改變。這些改變可能包括基因表達的變化、細胞形態(tài)的變異、生長速率的增加等。因此,傳代細胞可能需要進行鑒定和驗證,以確保其仍具有所需的生物學(xué)特性。
4.培養(yǎng)結(jié)果
原代培養(yǎng):所獲得的細胞在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上與體內(nèi)原組織相似性大,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這種培養(yǎng)方法常用于研究細胞在生理狀態(tài)下的生長、代謝和繁殖。
傳代培養(yǎng):由于細胞已適應(yīng)體外環(huán)境并且增殖速度快,傳代培養(yǎng)一般適用于獲得大量同種細胞以滿足實驗需求,如構(gòu)建組織工程產(chǎn)品、篩選和毒性測試等。5. 應(yīng)用領(lǐng)域
原代培養(yǎng):原代細胞通常用于篩選、毒理學(xué)測試、模型研究等領(lǐng)域。由于其保留了生物體的自然特性,因此被認為是更接近體內(nèi)條件的模型系統(tǒng)。
傳代培養(yǎng):傳代細胞被廣泛用于各種生物學(xué)研究,包括基因表達調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞周期調(diào)控等。傳代細胞系的穩(wěn)定性和一致性使得它們成為研究細胞生物學(xué)機制的理想模型。
6. 注意事項
原代培養(yǎng):需要嚴(yán)格控制無菌條件,避免細胞污染;注意細胞的存活率和純度,避免其他類型細胞的混雜;以及考慮細胞在體外環(huán)境下可能發(fā)生的表型和基因型改變。
傳代培養(yǎng):需要關(guān)注細胞的生長狀態(tài)和形態(tài)變化,定期檢查細胞是否存在污染或變異;注意傳代次數(shù),因為過多的傳代可能導(dǎo)致細胞老化或轉(zhuǎn)化。
公司正在出售的產(chǎn)品:
EPS8L1
豚鼠白介素2(IL-2)elisa生化檢測試劑盒
humanβ2-MGELISAKit
人輔酶Q10(CoQ10)elisa檢測試劑盒
人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa生化檢測試劑盒
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EPS8L1蛋白抗體
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IL-2ELISAKit
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神經(jīng)營養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 Anti-Neurotrophin 3/NT-3 proprotein
大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)elisa生化檢測試劑盒
維甲酸相關(guān)孤兒受體α抗體 Anti-ROR1/ROR alpha
IL-13ELISAKit
大鼠B細胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子α(NFKBIA)elisa檢測試劑盒
Casp4ELISAKit
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)elisa檢測試劑盒
小鼠T細胞;CTLL-2 [CTLL2]
細胞磷酸化酶活性染色試劑盒
EXTL2
MDA ELISA kit
MSL1蛋白抗體
倉鼠丙二醛(MDA)elisa生化檢測試劑盒
人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)elisa生化檢測試劑盒
MSL1
豬鼻腔粘膜上皮細胞外生性骨疣樣蛋白2抗體
?原代細胞培養(yǎng)的注意事項?:
一、在進行原代細胞培養(yǎng)時,需要注意以下幾點:
二、?無菌操作?:整個過程需要在無菌條件下進行,以防止污染。
?三、細胞融合和傳代?:跟蹤細胞的融合狀態(tài),適時進行傳代,避免細胞分化。
?四、冷凍保存和復(fù)蘇?:對于需要長期保存的細胞,可以進行冷凍保存,并注意復(fù)蘇時的操作細節(jié)。
?五、培養(yǎng)基的選擇和更換?:根據(jù)細胞類型選擇合適的培養(yǎng)基,并定期更換以保證營養(yǎng)充足。