原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無菌紗布過濾。取過濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開,注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過來,從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來源 |
胸腺組織 |
貨號(hào) |
P-X2273 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
產(chǎn)品類別 |
豬原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
長(zhǎng)梭形細(xì)胞 不規(guī)則細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述:
胸腺是機(jī)體重要的器官。其功能與緊密相關(guān),是T細(xì)胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所,還可以分泌胸腺及類物質(zhì),具有技能的器官。胸腺的表面有結(jié)締組織被膜,結(jié)締組織伸入胸腺實(shí)質(zhì)把胸腺分成許多不完全分隔的小葉,這些結(jié)締組織組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成,其作為支持細(xì)胞,對(duì)其他細(xì)胞起保護(hù)和支持作用。
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常胸腺組織。
2)細(xì)胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔外根鞘細(xì)胞 Rabbit outer root sheath cell |
雜交瘤細(xì)胞;2H5B12C3 |
小鼠骨細(xì)胞 Mouse primary bone cells |
雜交瘤細(xì)胞株;2F8 |
SF767 (人腦瘤細(xì)胞) |
人十二脂腸腺癌 |
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 |
人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 |
S-180 (小鼠腹水瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確) |
兔胃平滑肌細(xì)胞 Rabbit gastric smooth muscle cells |
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;STO |
大額牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-2 |
G1switch 2 |
人的牛血清白蛋白(BSA)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
SS ELISA Kit |
血清樣品樹脂法去內(nèi)試劑盒 |
牛生長(zhǎng)抑素(SS)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
大鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)elisa檢測(cè)試劑盒 |
尿酸酶 Anti-Uricase |
脲酶(UE)測(cè)試盒 |
G0/G1期開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 |
果菜碳水化合物比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
Goat Anti-Mouse IgG H&L / Cy5.5 |
BSAELISAkit |
Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG H&L |
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
等上游刺激因子1抗體 Anti-USF-1 |
E2 ELISA Kit |
原鈣粘附蛋白α8抗體 Anti-PCDHA8 |
驢雌二醇(E2)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
原鈣粘蛋白γA2抗體 Anti-PCDHGA2 |
sPLA2ELISAKit |
人Toll樣受體6(TLR6)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
Carboxypeptidase O |
小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
小鼠SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細(xì)胞;SRSV/3T3 |
大鼠白蛋白elisa檢測(cè)試劑盒 |
KGFLP1 |
JIK/TAOK3 |
RNA結(jié)合蛋白26抗體 |
JNK/ SAPK抑制激酶抗體 |
羧肽酶CPO抗體 |
RBM26 |
豬胸腺成纖維細(xì)胞成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子樣蛋白1抗體 |
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何問題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。