原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:
以胚胎小鼠為例
1.取材:將孕鼠拉頸椎處死,投入75%酒精浸泡數(shù)秒,提出孕鼠控掉酒精,放置于蠟盤中用大頭針固定。用手術(shù)器械逐層分離皮膚和肌肉組織,打開(kāi)腹腔。注意不同的解剖層次使用不同的器械。后取出雙角置于無(wú)菌平皿內(nèi)。
2.用Hanks液洗滌3次,剪開(kāi)取出胚胎。血液和筋膜等組織。
3.用彎頭剪把胚胎盡量剪碎,每個(gè)組織塊小于1mm3。在操作時(shí)應(yīng)盡量將平皿蓋半蓋住平皿以防空氣中塵埃落下污染組織。再用Hanks液洗滌2~3次,自然沉淀。用吸管吸去上清液。以下可按兩種方法進(jìn)行,即消化法和組織塊培養(yǎng)法。
4.若使用消化法,則將組織塊放人三角燒瓶?jī)?nèi)加入10~30mL0.125%胰蛋白酶,37℃磁力攪拌消化20多min。然后加入少量血清終止消化。用幾層無(wú)菌紗布過(guò)濾。取過(guò)濾液,800r/min離心5~10min收集細(xì)胞。棄上清,加入帶有雙抗的培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
注:細(xì)胞分離的方法各實(shí)驗(yàn)室不同,所采用的消化酶也不相同(如膠原酶,透明質(zhì)酶等)。
5.若進(jìn)行組織塊培養(yǎng),則不做步驟4,加入幾滴血清于組織塊中,再用彎頭吸管將組織塊懸液吸起。在一小培養(yǎng)瓶中逐個(gè)鋪展開(kāi),注意將瓶底涂抹均勻。將瓶子翻轉(zhuǎn)倒置后在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置2-3h。待組織塊微干與瓶壁粘牢后再輕輕將瓶子翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái),從邊角加入4~5mL培養(yǎng)基,使細(xì)胞接觸到培養(yǎng)基,放培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。
本產(chǎn)品于科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)使用、不得用于其它。
組織來(lái)源 |
胚胎組織 |
貨號(hào) |
P-X2316 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
5×105 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
產(chǎn)品類別 |
鴨原代細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
長(zhǎng)梭狀細(xì)胞 |
細(xì)胞詳述:
近年來(lái),有關(guān)干細(xì)胞的研究是生物技術(shù)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。胚胎成纖維細(xì)胞具有相對(duì)容易獲得,增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),因此胚胎成纖維細(xì)胞常作為哺乳動(dòng)物干細(xì)胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層細(xì)胞,主要分泌謀學(xué)細(xì)胞因子,如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,白血病抑制因子等,以促進(jìn)干細(xì)胞增殖及抑制分化。
該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。
細(xì)胞特性:
1) 細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常胚胎組織。
2) 細(xì)胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:長(zhǎng)梭狀細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
相關(guān)產(chǎn)品:
兔輸尿管上皮細(xì)胞 Rabbit ureteral epithelial cells |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;JF-IgD |
小鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞 Mouse primary hippocampal neural stem cells |
雜交瘤細(xì)胞株;T-Ⅱ |
SK-NEP-1 (人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 |
小鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 |
人髓樣甲狀腺腫瘤細(xì)胞 |
RT4 (人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
兔外根鞘細(xì)胞 Rabbit outer root sheath cell |
小鼠腦瘤細(xì)胞;MB39 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;1H8 |
HumanLeptospiraIgGELISAKit |
12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框61抗體 |
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體 Anti-XIAP/BIRC4 |
金屬元素定量檢測(cè)試劑專題 |
神經(jīng)細(xì)胞分化因子2抗體 Anti-Neuro D2 |
新朊蛋白抗體(C端) Anti-SPRN |
染色體分離調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Anti-RCS1/FAM64A |
人鉤端螺旋體IgG(Leptospira)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
鈉依賴性脯氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體 Anti-SLC6A7/PROT |
D2D ELISA Kit |
C12ORF61 |
大鼠D二聚體(D2D)elisa生化檢測(cè)試劑盒 |
大鼠甾醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1C SREBP-1C elisa檢測(cè)試劑盒 |
磷酸化鋅指蛋白36抗體 Anti-phospho-ZFP36L1(Ser334) |
MAFK |
RAN結(jié)合蛋白1抗體 Anti-RanBP1 |
轉(zhuǎn)錄因子MAFK抗體 |
環(huán)指蛋白107抗體 Anti-NIRF |
冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
磷脂酶A2激活蛋白抗體 Anti-PLAP/Phospholipase A2 activator protein |
CALHM1 |
血小板源性生長(zhǎng)因子BB抗體 Anti-PDGFBB |
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14;MC3T3-E1 Subclone 14 |
血管**素受體1抗體 Anti-TIE1 |
EBPL |
Pancreatic Lipase |
單克隆抗體 |
胰脂肪酶抗體 |
鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 |
Morphine(2F11) |
鴨胚胎成纖維細(xì)胞EBPL蛋白抗體 |
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要后方能丟棄。
5.客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,有任何問(wèn)題可聯(lián)系我們?cè)诰€客服。