酶聯(lián)免 疫吸附試驗ELISA是酶免 疫測定技術(shù)中應(yīng)用廣泛的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面，使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法，前者用于檢測大分子抗原，后者用于測定特異抗體。

    實驗室人員收到標本后應(yīng)認真查對，對不符合要求的標本和申請單要拘收，合格標本要及時分離血清，避免溶血，提取血清時不應(yīng)混有大量纖維蛋白或細胞成分。對不能及時檢測的標本要妥善保存于4℃冰箱，做好原始記錄，標本管上標上待檢者姓名、日期。從冰箱取出的標本要預溫至室溫，對冰凍的樣品要融化好，并充分混勻再用。操作過程注意事項:

1、操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，是否符合要求。

2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說明書一致，否則可導致結(jié)果錯誤，實驗重復性差。

3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流，造成孔問污染，導致假陰性或假陽性。

4、要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯誤。

5、顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過多，以免顯色過強。